蛋白質晶體板制作

設計并制作了一種在微腔中對蛋白質進行微批量法(microbatch)結晶的碟式微流控結晶芯片,它是一種高通量、低成本、低耗樣量(納升級)、操作簡便的蛋白質結晶篩選方法,這種芯片能成功地結晶溶菌酶(lysozyme)和青色熒光蛋白(CyPet).為了系統(tǒng)地比較這種微流控芯片與傳統(tǒng)的使用蒸汽擴散法的24孔結晶板的結晶能力,用3個Hampton結晶試劑盒,在4℃及20℃培養(yǎng)條件下分別對5種標準蛋白(溶菌酶(lysozyme)、木聚糖酶(xylanase)、脂肪酶B(lipase B)、葡萄糖異構酶(glucose isomerase)和嗜熱菌蛋白酶(thermolysin))進行了結晶篩選實驗.結果表明,在4℃時微流控芯片與24孔結晶板有相近數(shù)目的結晶條件(91 vs 98)。

蛋白結晶板使用

主要表現(xiàn)在2個方面:一是在傳統(tǒng)結晶方法和試劑基礎上發(fā)展起來的一系列新的的結晶技術和篩選試劑盒;二是從生物學,物理學和化學等角度提出的一些提高結晶篩選效率的新技術,主要包括通過分子工程改造蛋白,提高蛋白溶液的穩(wěn)定和均一性,導入籽晶,共結晶,改善結晶界面和變溫篩選等技術.展望了該領域未來的發(fā)展趨勢。

蛋白質晶體板介紹

蛋白質晶體結構，對蛋白質晶體用X射線衍射法解出蛋白質分子中各原子排列的三維結構。在晶體中各蛋白質分子以有序的晶胞形式重復排列，其形成受蛋白質的純度和濃度、pH值、溫度、沉淀劑等影響。由于遺傳工程、同步輻射裝置、探測和分析技術、結晶自動化等技術的飛躍進步，已獲得的蛋白質晶體結構從初“蛋白質數(shù)據(jù)庫”

目前,仿生合成是制備純文石的有效方法之一,它是依據(jù)生物礦化原理,以有機物的組裝體為模板制備出具有的結構及優(yōu)異的物理和化學性能的無機材料。本文利用生物礦化原理,在常溫常壓下以新型蛋白質,即竹蟶韌帶纖維狀蛋白質層為基底,采用氣體擴散法,通過氯化鈣溶液和二氧化碳反應制備了納米文石晶體且具有梭狀,捆狀,球狀,花狀,狀和板片狀超結構。