凍存袋技術(shù)

是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝，以便長期儲存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一，起到了細(xì)胞保種的作用。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。

凍存袋細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟

1.操作人員應(yīng)戴防護(hù)面罩及手套，防止冷凍管可能爆裂之傷害。

2.自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊，由于熱脹冷縮過程，此時蓋子易松掉。

3.將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水槽中回溫，回溫后噴以70酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。

4.取出冷凍管，立即放入3℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，以7O%酒精擦拭保存管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。

5.取出解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi)(稀釋比例為1:10~1:15)，混合均勻，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。取0.1m1解凍細(xì)胞懸浮液作存活測試。

6.解凍后是否立即去除冷凍保護(hù)劑，依細(xì)胞種類而異，一般而言，大都不需要立即去除冷凍保護(hù)劑。惟若要立即去除，則將解凍之細(xì)胞懸浮液加入含有5-10m1培養(yǎng)基之離心管內(nèi)，離心 1000rpm，5分鐘，移去上清液，加入新鮮培養(yǎng)基，混合均勻，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

凍存袋簡介

屬于醫(yī)院器械領(lǐng)域,涉及一種適合細(xì)胞回輸用的細(xì)胞凍存袋,即生物樣品存儲袋,包括:一存儲袋袋體和與其逐一并排排列的2~6個第二存儲袋袋體;一和第二存儲袋袋體之間,以及各個第二存儲袋袋體之間設(shè)置袋體間連接管路;一存儲袋袋體上沿設(shè)置一輸入口并通過該輸入口與連接管的一端連接,生物樣品經(jīng)由連接管并通過輸入口進(jìn)入一存儲袋袋體;一存儲袋袋體上沿設(shè)置一取樣口,各個第二存儲袋袋體上沿設(shè)置第二取樣口,一取樣口和第二取樣口用于將存儲在袋體內(nèi)的生物樣品取出.本存儲袋能夠方便地用于對生物樣品例如臍帶血造血千細(xì)胞,血漿等處置,存儲,冷凍,復(fù)蘇以及直接給患者回輸生物樣品特別是造血細(xì)胞.

凍存細(xì)胞的裝置及方法

本發(fā)明的裝置由細(xì)胞凍存袋;細(xì)胞凍存盒,細(xì)胞架組成,細(xì)胞凍存袋置于細(xì)胞架上,細(xì)胞架置于細(xì)胞凍存盒內(nèi).批量凍存細(xì)胞的方法:將細(xì)胞懸液裝入細(xì)胞凍存袋中置于細(xì)胞架上,再將細(xì)胞架放入細(xì)胞凍存盒內(nèi);將細(xì)胞凍存盒投入液氮罐或-7O°C以下冷凍設(shè)備冷凍24小時,將細(xì)胞凍存袋取出投入液氮中或-70CI以下冷凍設(shè)備長期凍存,當(dāng)需解凍細(xì)胞時,拉出細(xì)胞凍存袋放入38C-39C℃ 的溫水中解凍當(dāng)凝固物都融化為液體后移入無菌操作臺,按無菌操作程序操作將細(xì)胞凍存袋中的細(xì)胞懸液分裝入離心管中離心,棄上清液,按常規(guī)解凍細(xì)胞來操作.本發(fā)明的細(xì)胞凍存袋凍存細(xì)胞體積達(dá)50-200ml,整套裝置直接投入液氮中或放入-70°C以下冷凍設(shè)備.