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PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)
試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)設(shè)緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。PCR實(shí)驗(yàn)室沒有嚴(yán)格的凈化要求,可以根據(jù)用戶的使用情況和資金的投入選擇。
PCR實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制
PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,但是為避免各個實(shí)驗(yàn)區(qū)域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
各區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、與氣流,形成單向流程的保護(hù)屏障,避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾,防止氣溶膠擴(kuò)散對實(shí)驗(yàn)過程造成污染。
PCR實(shí)驗(yàn)室工作基本原則
由于紫外照射的距離和能量對去污染的效果非常關(guān)鍵,因此可使用可移動紫外燈(254nm波長),在工作完成后調(diào)至實(shí)驗(yàn)臺上60~90cm內(nèi)照射。
PCR實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn),PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)簡稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA,可看作生物體外的特殊DNA。通過DNA基因追系統(tǒng),能迅速掌握生物體內(nèi)的病毒含量,其精準(zhǔn)度高達(dá)納米級別。
幾個區(qū)域的大小設(shè)置情況,試劑準(zhǔn)備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū),空間可以相對小一些,樣品制備區(qū)要放置生物安全柜和低溫冰箱,空間應(yīng)大一些。
PCR實(shí)驗(yàn)室布局
PCR實(shí)驗(yàn)室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個單獨(dú)的工作區(qū)域并設(shè)有專用走廊,各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間,工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。
不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的,各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志,不能直通,如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū),后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū),擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開。
PCR實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng)——擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)
用過的吸頭也必須放至1 mol/L HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理,如焚燒。由于本區(qū)有可能會用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì),故應(yīng)當(dāng)注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。