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常規(guī)除氣方法1.吹氦脫氣。使用氦氣在液體中溶解度低于空氣這一特性，在0.1 MPa壓力下，大約60 mL/min的流速通入流動(dòng)相儲(chǔ)液容器10~15 min，就能有效地將溶解的空氣從流動(dòng)相中排除，可有效排除80%的氧氣。利用一種的分布式噴射裝置，一體積中的氦氣可以從流動(dòng)相中幾乎全部體積中排除。這就是說，1 L氦氣可以通過1 L流動(dòng)相進(jìn)行排氣。這樣的脫氣方法是好的，但是我國氦氣價(jià)格比較高，很少有實(shí)驗(yàn)室采用這種方法。

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2.加熱回流法。該方法的脫氣效果較好。運(yùn)行時(shí)要注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑流失，混流相比例將發(fā)生變化。3.抽真空除氣。這種方法可以用真空泵，將溶解氣體降到0.05~0.07 MPa。但真空脫氣將改變混合溶劑的組成，從而影響實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性，故多用于單溶劑體系的分析。4.超聲波除氣。超聲波清洗機(jī)內(nèi)用超聲波對(duì)欲脫氣進(jìn)行振蕩10~20分鐘。該方法的脫氣效果差。5.聯(lián)機(jī)通風(fēng)?，F(xiàn)商品 HPLC儀表，可與線式脫氣機(jī)配套。聯(lián)機(jī)除氣簡單，故障少，效果好。推薦購買儀器時(shí)一定要購買，有些公司為選購件，所以與儀器公司談配置時(shí)要和公司確認(rèn)。

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壓強(qiáng)和流量不穩(wěn)定？其原因可能是需要排除的氣泡；或單向閥內(nèi)有異物，可卸下單向閥，浸入內(nèi)超聲清洗。有時(shí)候可以是砂濾棒內(nèi)部出現(xiàn)氣泡，或者被細(xì)小鹽粒或滋生微生物部分堵塞，此時(shí)，可卸下砂濾棒浸入流動(dòng)相超聲除氣泡，或?qū)⑸盀V棒浸入稀酸(如4 mol/L)中迅速除去微生物，或?qū)Ⅺ}溶解，再立即清洗。

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為什么壓力太大還是太低？也許是管道堵塞了，需要清理清理。另一種可能是由于管道出現(xiàn)了泄漏。檢驗(yàn)阻塞或泄漏時(shí)，應(yīng)逐段進(jìn)行。采用梯度洗脫時(shí)，由于多種溶劑混和成分發(fā)生變化，造成了一些特殊問題，必須引起注意：PS:(在液相色譜中對(duì)成分復(fù)雜的樣品，采用梯度洗脫法。在同一分析周期內(nèi)，不停地改變流動(dòng)相的濃度比例，稱為梯度洗脫。這樣，在一個(gè)復(fù)雜樣品中，性質(zhì)差異較大的組分，就能達(dá)到各自合適的容量因子 k的分離效果。采用梯度洗脫法的優(yōu)點(diǎn)：1.縮短分析周期2.提高分離能力3.改善峰型，很少拖尾；4.提高靈敏度。但是有時(shí)會(huì)導(dǎo)致基線偏移。)坡度洗脫的流動(dòng)相選擇不當(dāng)…要注意溶劑的溶解性，不相容性溶劑不能作為梯度洗脫的流動(dòng)相。部分溶劑混溶于一定比例，超過一定范圍后就不能互溶，使用時(shí)更要注意。同時(shí)，在與緩沖溶液混合時(shí)，也會(huì)發(fā)生與緩沖劑混合，在使用過程中需要特別注意。

色譜條件：通常的色譜條件包括流動(dòng)相、色譜柱、檢測波長、流速和進(jìn)樣量。移動(dòng)相是指在制備流動(dòng)相所用水和試劑試液時(shí)，水的電阻率一般不超過18.2兆歐，而水的電阻率不超過18.2兆歐，其原因是為了防止水和試劑試液中雜質(zhì)對(duì)色譜結(jié)果的干擾，測試液采用色譜級(jí)別。用不同的方法對(duì)色譜柱會(huì)有不同的要求，但是每一種色譜柱都有其清潔要求，這在色譜柱中可以找到，必須按照以上的要求來進(jìn)行，否則會(huì)導(dǎo)致色譜柱效下降，色譜柱的使用壽命縮短，檢測波長會(huì)因品種的不同而有不同的要求，這里需要指出的是要注意觀察檢測器燈能量的變化，如基線波動(dòng)大，活性成分的響應(yīng)值突然變小等，對(duì)檢測器電鏡能量的變化有可能是突然變小等。流動(dòng)速度也因品種而異，一般為1.0 ml/min，流速不能隨意改變，尤其作為 QC人員，但作為研發(fā)人員，有時(shí)為了摸索條件或進(jìn)行方法耐用性驗(yàn)證，會(huì)改變流速來評(píng)估該方法的適用性。對(duì)不同品種的進(jìn)樣量也有不同的規(guī)定，進(jìn)樣量這個(gè)現(xiàn)在都是自動(dòng)進(jìn)樣，所以進(jìn)樣精密度都是很好的，不用特別強(qiáng)調(diào)。

，作為液相操作人員，必須認(rèn)真學(xué)習(xí)夜想說明書，掌握液相硬件和軟件的操作，掌握日常維護(hù)，掌握基本故障的排除與維修。普通液相的操作規(guī)程也是由操作人員起草的，所以只要嚴(yán)格按照操作要求操作，一般都不會(huì)出現(xiàn)問題，當(dāng)然要特別指出的是對(duì)液相的日常維護(hù)保養(yǎng)，如：液相的日常維護(hù)保養(yǎng)，泵密封墊的清洗，系統(tǒng)管路的清洗，溶劑過濾頭的清洗等。第二，操作者在配制液相分析樣品時(shí)，好由同一人單獨(dú)完成，以免不必要的意外誤差。

泵使用要點(diǎn)把裝有溶劑瓶的溶劑箱放在泵上或更高的地方。對(duì)于四元泵，當(dāng)使用鹽溶液或時(shí)，建議將鹽溶液與下方梯度閥口連接，使與上面梯度閥口連接，通道好在水或鹽溶液通道的正上方。推薦用水定期沖洗MCGV通道，去除可能在閥口析出的鹽結(jié)晶。開泵前，用至少兩個(gè)容積(標(biāo)準(zhǔn)脫氣機(jī)30 mL，微脫氣機(jī)10 mL)沖洗真空脫氣機(jī)，尤其是關(guān)閉一段時(shí)間后(如過夜)，以及通道中使用揮發(fā)性混合溶劑，防止溶劑瓶內(nèi)的玻璃濾頭(過濾器)堵塞和長菌，濾頭表面有黑色或黃色污染說明發(fā)生堵塞，應(yīng)立即清洗或更換。

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經(jīng)常檢查排液閥的白頭過濾。檢驗(yàn)方法：旋開排液閥，用水作流動(dòng)相。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)脫氣機(jī)(G1322A)，流量5 ml/min的流量，如果壓力超過10 bar，建議更換。對(duì)微型脫氣機(jī)(G1379A)，流量2 ml/min的流量，如果壓力超過5 bar，建議更換。使用低流速時(shí)，應(yīng)檢查所有1/16英寸接頭是否有泄漏(用壓力試驗(yàn)或液體泄漏試驗(yàn))。無論何時(shí)更換泵密封墊，排液閥的慮芯也應(yīng)更換。對(duì)活塞密封墊進(jìn)行更換時(shí)，應(yīng)檢查活塞桿是否有劃痕。擦傷的活塞會(huì)造成輕微的泄漏，降低密封墊的使用壽命。擦傷的活塞應(yīng)盡早更換。在使用緩沖溶液時(shí)，在關(guān)閉泵之前先用水沖洗系統(tǒng)。如果要長時(shí)間使用0.1摩爾或更高濃度的緩沖液，好選擇密封墊清洗附件，以減少密封墊和活塞桿的磨損。若使用高濃度緩沖鹽，可考慮采用熱水(50-60℃)沖洗鹽通道，以確保系統(tǒng)中不存在緩沖鹽殘留。