低溫生物菌種的注意事項

無論采用何種保藏方法，首先應該挑選典型菌種的優(yōu)良純種來進行保藏，保藏它們的休眠體，如分生孢子、芽孢等。其次，應根據(jù)微生物生理、生化特點，人為地創(chuàng)造環(huán)境條件，使微生物長期處于代謝不活潑、生長繁殖受抑制的休眠狀態(tài)。這些人工造成的環(huán)境主要是干燥、低溫和缺氧，另外，避光、缺乏營養(yǎng)、添加保護劑或酸度中和劑也能有效提高保藏效果。

如何對微生物菌種進行活化

1 定期移植法的菌種復蘇較簡單，直接轉接即可；

2 液體石蠟法保存的菌種在復蘇時，挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上，生長繁殖后，再重新轉接一次；

3  沙土管法保存菌種在復蘇時，在無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上，長出菌落后再轉接一次?；蛉∩惩亮Ｓ谶m宜的液體培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)后再轉接斜面；

4  真空冷凍干燥法保存菌種在復蘇時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部，將安瓿管頂部燒熱， 用無菌棉簽沾冷水，在頂部擦一圈，頂部出現(xiàn)裂紋，用挫刀或鑷子頸部輕叩一下，敲下已開裂的安瓿管的頂端，用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌塊，使用無菌吸管移入新鮮培養(yǎng)基上，進行適溫培養(yǎng)；

5  -80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇時，從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動。直到內(nèi)部結冰全部溶解為止，約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)

6  液氮超低溫凍結法保存菌種復蘇與-80℃ 冰箱凍結法保存菌種復蘇相似，從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管，應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當搖動。直到內(nèi)部結冰全部溶解為止，一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管，將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。

低溫生物菌種處理的優(yōu)勢

我國北方污水處理一直受到低溫影響，尤其氨氮處理效果差、出水難以達標等問題的困擾。目前污水廠一般采用增加污泥濃度、水力停留時間、池體保溫加蓋等措施以提高處理效果，但投資和運行費用增加的問題也隨之而來。溫度降低所導致的生物處理效果下降，歸根結底是由于當水溫低于15℃時，處生化系統(tǒng)中存在的低溫微生物的數(shù)量和活性不能達到常溫下中溫菌的水平，污水中的有機污染物質不能被迅速降解所導致的。因此，采用投加耐低溫生物菌劑的方式對東北地區(qū)污水處理廠生化處理系統(tǒng)的耐低溫菌種改良，對低溫快速啟動和污水處理廠污水穩(wěn)定達標排放意義重大。

                                                 低溫生物菌種的分離方法有哪些？

先將所需的種藥用真菌采集回來，選取新鮮、個體大、壯實、中齡及無病蟲害的子實體（或菌核、菌索），作為分離用的材料。若為子實體，取其菌蓋或菌柄組織；若為菌核，取其全部或部分（如茯苓）菌核；若為菌索，取其部分根狀菌索（如蜜環(huán)菌）。再用0.1 %或75 %酒精進行表面消毒2 分鐘，用無菌水（或冷開水）沖洗數(shù)次，洗凈殘留的藥液后切成小塊。，然后，放入PDA 培養(yǎng)基的試管或培養(yǎng)皿上，置24 ～26℃溫度下，培養(yǎng)5 ～ 7 天。在分離的真菌組織周圍見長有白色菌絲時，應及時將菌絲移至斜面試管培養(yǎng)基上，再置溫度24 ～26 ℃下培養(yǎng)7～10 天，即得純菌種。所得的純菌種還可繼續(xù)擴大培養(yǎng)或保藏。