菌種保藏的目的、原理及常用的方法有哪些？

微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過(guò)程中，必須使微生物的代謝處于不活躍或相對(duì)靜止的狀態(tài)，才能在一定的時(shí)間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。

低溫、干燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素，所以，菌種保藏方法雖多，但都是根據(jù)這三個(gè)因素而設(shè)計(jì)的。

保藏方法大致可分為以下幾種：

1．傳代培養(yǎng)保藏法

又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細(xì)菌用），培養(yǎng)后于4—6℃冰箱內(nèi)保存。

2．液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種存活率，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。

3．載體保藏法

是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。

4．寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。

5．冷凍保藏法

可分低溫冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6．冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。

                                                         喚醒盛水的低溫生物菌種

目前，保藏中心保存有各類(lèi)微生物資源5700種、50000余株，用于專(zhuān)利程序的生物材料有1萬(wàn)余株。那么，數(shù)目龐大的微生物資源，從“清醒”到被“沉睡”經(jīng)歷了什么？

“首先進(jìn)行存活度和純度檢測(cè)，然后用基因測(cè)定來(lái)核實(shí)菌種的正確性，繼而用真空冷凍干燥法或液氮超低溫凍結(jié)法保存菌種。”保藏菌種時(shí)一般兩種方法會(huì)互為備份，使用液氮法保存6份，真空法則要備份12個(gè)。

“通過(guò)冷凍技術(shù)處理后，細(xì)菌就會(huì)處于休眠狀態(tài)。如果要活化使用，則需通過(guò)相應(yīng)的培養(yǎng)液進(jìn)行活化，才能恢復(fù)活性。”以格氏嗜鹽堿為例說(shuō)，復(fù)活菌種所需的營(yíng)養(yǎng)為：20%的氯化鈉，酪蛋白、氨基酸、pH值為9等，在適宜的溫度和培養(yǎng)基中，這些沉睡的細(xì)菌便會(huì)被重新喚醒。

                                                  低溫生物菌種的使用方法

1.電化學(xué)法：利用電解作用，把水中污染物去除，以達(dá)到去除COD的作用。

2.吸附法：通過(guò)活性炭，大孔樹(shù)脂，膨潤(rùn)土等活性吸附材料，吸附處理污水里的顆粒有機(jī)物，色度?？梢宰鳛榍疤幚?，降低比較容易處理的COD。4，微生物法：靠微生物酶來(lái)氧化或還原有機(jī)物分子，破壞其不飽和鍵及發(fā)色基團(tuán)，從而達(dá)到去除COD的目的，微生物繁殖速率快。去除COD的方法：1適應(yīng)性強(qiáng)。使不溶性物質(zhì)形成沉淀去除COD混凝法：向廢水中投加絮凝劑成本低廉，適應(yīng)水量較大企業(yè)。5 化學(xué)法：投加化學(xué)藥劑，利用藥劑的氧化作用分解有機(jī)物，破壞其結(jié)構(gòu)，終達(dá)到去除COD的作用，且破壞能力強(qiáng)，反應(yīng)時(shí)間短，出水口投加藥劑即可（推薦使用）。高濃度時(shí)，COD怎么處理？高濃度COD廢水，不適合直接生物法處理，化學(xué)法也有一定難度，建議用吸附法，焚燒法處理。煤粉吸附法：利用媒粉進(jìn)行初步混凝，吸附處理，再用催化氧化和酸性凝聚，再用煤粉混凝，吸附。

優(yōu)點(diǎn)：色度和COD可分別去除100%，90%，具有較好的處理效果。焚燒法：該法在保證鍋爐安全運(yùn)行的條件下，能對(duì)高濃度有機(jī)廢水徹底焚燒處理，優(yōu)點(diǎn)：是初投資省，運(yùn)行費(fèi)用低。臭氧氧化技術(shù)以及安全消毒技術(shù)的應(yīng)用，努力改善城市污水處理水平，達(dá)到再生水的指標(biāo)要求，提高水的重復(fù)利用率。同時(shí)要努力推進(jìn)污泥無(wú)害化處置的技術(shù)進(jìn)步。不適應(yīng)城市污水處理再生利用的要求。從當(dāng)?shù)貙?shí)際情況出發(fā)在城市污水處理的工藝上必須按照“大化利用”的原則因此出水沒(méi)有消毒工藝部分二級(jí)處理工藝中也沒(méi)有考慮除磷脫氮功能目前有相當(dāng)一部分城市已建成的污水處理廠采用的是 處理或 強(qiáng)化處理推廣污泥的資源化利用。爭(zhēng)取由單一的處理工藝改造為綜合處理工藝，通過(guò)積極推廣各種膜分離技術(shù)。