實時熒光定量pcr儀

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實時熒光定量pcr儀，由熒光定量系統(tǒng)和計算機組成，用來監(jiān)測循環(huán)過程的熒光。

與實時設備相連的計算機收集熒光數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)通過開發(fā)的實時分析軟件以圖表的形式顯示。原始數(shù)據(jù)被繪制成熒光強度相對于循環(huán)數(shù)的圖表。

原始數(shù)據(jù)收集后可以開始分析。實時設備的軟件能使收集到的數(shù)據(jù)進行正?；幚韥韽浹a背景熒光的差異。正常化后可以設定域值水平，這就是分析熒光數(shù)據(jù)的水平。

熒光定量PCR儀的技術原理

萊普特——熒光定量PCR儀專業(yè)供應商，我們?yōu)槟峁┮韵滦畔ⅰ?/span>

所謂real-time Q-PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基因，利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。在 real-time 技術的發(fā)展過程中，兩個重要的發(fā)現(xiàn)起著關鍵的作用：（1）在90年代早期，TaqDNA多聚酶的5′核酸外切酶活性的發(fā)現(xiàn)，它能降解特異性熒光記探針，因此使得間接的檢測PCR產(chǎn)物成為可能。（2）此后熒光雙標記探針的運用使在一密閉的反應管中能實時地監(jiān)測反應全過程。這兩個發(fā)現(xiàn)的結合以及相應的儀器和試劑的商品化發(fā)展導致real-time Q-PCR方法在研究工作中的運用。

熒光定量PCR的病原體檢測

目前，采用熒光定量PCR檢測技術可以對解脲支原體、人類瘤病毒、單純病毒、肝的病毒、病毒、EB病毒和巨細胞病毒等病原體進行定量測定。與傳統(tǒng)的檢測方法相比具有靈敏度高、取樣少、快速簡便等優(yōu)點。如：菌基因診斷的意義主要表現(xiàn)在：a.區(qū)分TB；b.檢測TB耐藥基因；c.提高TB的陽性檢出率。

熒光定量PCR

熒光定量PCR( realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ PCR) 是1996 年由美國Applied Biosystems 公司推出的一種新定量試驗技術，它是通過熒光染料或熒光標記的特異性的探針，對PCR產(chǎn)物進行標記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應過程，結合相應的軟件可以對產(chǎn)物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。