{微生物檢測(cè)}標(biāo)準(zhǔn)

——微生物檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)——

GB 4789.15-2010食品安全標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 霉菌和酵母計(jì)數(shù)

GB 4789.35-2010食品安全標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 乳酸菌檢驗(yàn)

GB 4789.4-2010食品安全標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)

GB 4789.26-2013食品安全標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 商業(yè)無(wú)菌檢驗(yàn)

GB 4789.5-2012食品安全標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 志賀氏菌檢驗(yàn)

GB 4789.14-2014食品安全標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 蠟樣芽胞gan菌檢驗(yàn)

GB 4789.11-2014食品安全標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) β型溶血性鏈球菌檢驗(yàn)

GB 4789.41-2016食品安全標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 腸gan菌科檢驗(yàn)

《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》（2015版）

《中國(guó)藥典》（2015版）

抑菌效力

抑菌劑效力測(cè)定用培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查，包括成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按配制的培養(yǎng)基均應(yīng)檢查。

7.2試驗(yàn)所用的菌株傳代次數(shù)不得超過(guò)5代（從保藏中心獲得的冷凍干燥為第0代），并采用適宜的保藏技術(shù)進(jìn)行保存，以保證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特性。

銅綠假單胞菌     （Pseudomonas aeruginosa）〔CMCC(B)10 104〕

大腸埃希菌        （Escherichia coli） 〔CMCC(B) 44 102〕

金黃色菌 （Staphylococcus aureus）〔CMCC(B)26 003〕

白色菌         （Candida albicans） 〔CMCC(F) 98 001〕

黑曲霉                （Aspergillus  niger） 〔CMCC(F)

98 003〕

微生物限度檢查

計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)

   1.供試液制備

   根據(jù)供試品的理化特性與生物學(xué)特性，采取適宜的方法制備供試液。供試液制備若需加溫時(shí)，應(yīng)均勻加熱，且溫度不應(yīng)超過(guò)45℃。供試液從制備至加入檢驗(yàn)用培養(yǎng)基，不得超過(guò)1 小時(shí)。

   常用的供試液制備方法如下。如果下列供試液制備方法經(jīng)確認(rèn)均不適用，應(yīng)建立其他適宜的方法。

   （1）水溶性供試品 取供試品，用pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，或pH7.2磷酸鹽緩沖液，或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基溶解或稀釋制成1：10供試液。若需要，調(diào)節(jié)供試液pH值至6～8。7-2013食品安全標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)副溶血性弧菌檢驗(yàn)GB4789。必要時(shí)，用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。水溶性液體制劑也可用混合的供試品原液作為供試液。

   （2）水不溶性非油脂類(lèi)供試品 取供試品，用pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，或pH7.2磷酸鹽緩沖液，或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基制備成1：10供試液。分散力較差的供試品，可在稀釋液中加入表面活性劑如0.1%的聚山梨酯80，使供試品分散均勻。30-2010食品安全標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)GB4789。若需要，調(diào)節(jié)供試液pH值至6～8。必要時(shí)，用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。

   （3）油脂類(lèi)供試品 取供試品，加入無(wú)菌十四烷酸異丙酯使溶解，或與zui少量并能使供試品乳化的無(wú)菌聚山梨酯80或其他無(wú)抑菌性的無(wú)菌表面活性劑充分混勻。檢驗(yàn)結(jié)果以1g、1ml、10g、10ml、10c㎡為單位報(bào)告，特殊品種可以最xiao包裝單位報(bào)告。表面活性劑的溫度一般不超過(guò)40℃（特殊情況下，zui多不超過(guò)45℃），小心混合，若需要可在水浴中進(jìn)行，然后加入預(yù)熱的稀釋液使成1：10供試液，保溫，混合，并在zui短時(shí)間內(nèi)形成乳狀液。必要時(shí)，用稀釋液或含上述表面活性劑的稀釋液進(jìn)一步10倍系列稀釋。

   3.MPN 法

   取規(guī)定量供試品，按方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法進(jìn)行供試液制備和供試品接種，所有試驗(yàn)管在30～35℃培養(yǎng)3～5天，如果需要確認(rèn)是否有微生物生長(zhǎng)，按方法適用性試驗(yàn)確定的方法進(jìn)行。將微生物接到適于它生長(zhǎng)繁殖的人工培養(yǎng)基上或活的生物體內(nèi)的過(guò)程叫做接種。記錄每一稀釋級(jí)微生物生長(zhǎng)的管數(shù)，從表3査每1g 或1ml供試品中需氧菌總數(shù)的可能數(shù)。

   結(jié)果判斷

   需氧菌總數(shù)是指胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的總菌落數(shù)（包括真菌菌落數(shù)）；霉菌和酵母菌總數(shù)是指沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的總菌落數(shù)（包括細(xì)菌菌落數(shù)）。41-2016食品安全標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)?zāi)cgan菌科檢驗(yàn)《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》（2015版）《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》（2015版）《中國(guó)藥典》（2015版）。若因沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)菌使霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)結(jié)果不符合微生物限度要求，可使用含kang生素（如氯霉su、慶大霉su）的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基或其他選擇性培養(yǎng)基（如玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基）進(jìn)行霉菌和酵母菌總數(shù)測(cè)定。使用選擇性培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基適用性檢查。若采用MPN法，測(cè)定結(jié)果為需氧菌總數(shù)。