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細(xì)胞在旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)注意事項(xiàng)!
1) 如果細(xì)胞未在轉(zhuǎn)瓶中培養(yǎng),只需搖晃、刮取或胰蛋白酶處埋(見(jiàn)下文“胰蛋白酶處理分離細(xì)胞”)即可將細(xì)胞從細(xì)胞瓶表面分離下來(lái)。
2) 輕輕地吹打細(xì)胞(移液管上下吹打),將細(xì)胞團(tuán)吹散。
3) 取1ml 細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),勿讓細(xì)胞沉積在瓶底。輕輕來(lái)回轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞處于懸浮狀態(tài)。
4) 稀釋細(xì)胞,使其終濃度約為每毫升 2x105~4x105。
5) 進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),并用臺(tái)盼藍(lán)排斥試驗(yàn)進(jìn)行細(xì)胞活力檢測(cè),操作方案見(jiàn)下文“細(xì)胞計(jì)數(shù)”。
轉(zhuǎn)瓶細(xì)胞懸浮培養(yǎng)專用低析出硼硅玻璃培養(yǎng)瓶
什么是細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)?
轉(zhuǎn)瓶細(xì)胞懸浮培養(yǎng)專用低析出硼硅玻璃培養(yǎng)瓶
懸浮培養(yǎng)指的是一種在受到不斷攪動(dòng)或搖動(dòng)的液體培養(yǎng)基里,培養(yǎng)單細(xì)胞及小細(xì)胞團(tuán)的組織培養(yǎng)系統(tǒng),是非貼壁依賴性細(xì)胞的一種培養(yǎng)方式。某些貼壁依賴性細(xì)胞經(jīng)過(guò)適應(yīng)和選擇也可用此方法培養(yǎng)。增加懸浮培養(yǎng)規(guī)模相對(duì)比較簡(jiǎn)單,只要增加體積就可以了。深度超過(guò)5mm,需要攪動(dòng)培養(yǎng)基,超過(guò)10cm,還需要深層通入CO2和空氣,以保證足夠的氣體交換。通過(guò)振蕩或轉(zhuǎn)動(dòng)裝置使細(xì)胞始終處于分散懸浮于培養(yǎng)液內(nèi)的培養(yǎng)方法。另外由于生物反應(yīng)器容積的擴(kuò)大,但不明顯影響終端產(chǎn)品的均一性,能使得后期產(chǎn)品產(chǎn)量提高,質(zhì)量獲得改善。
英國(guó)進(jìn)口TECHNE低析出硼硅玻璃旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶
英國(guó)進(jìn)口TECHNE低析出硼硅玻璃旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶
一種用于微載體培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶。具有攪拌漿高度可調(diào)控,具有內(nèi)凸的玻璃瓶底,以及可防止細(xì)胞在葉輪下受積壓損傷的特點(diǎn)的容器。 瓶體容積范圍在125ML-5000ML之間。轉(zhuǎn)瓶細(xì)胞懸浮培養(yǎng)專用低析出硼硅玻璃培養(yǎng)瓶,培養(yǎng)容器結(jié)合了獨(dú)特的基礎(chǔ)設(shè)計(jì),與球頭攪拌器一起,確保以X低可能的速度將細(xì)胞提升到懸浮液中。攪拌器產(chǎn)生的熱量幾乎可以忽略不計(jì),所以,從磁力攪拌器到培養(yǎng)瓶的熱量傳遞幾乎沒(méi)有,使得該磁力攪拌器很適合于培養(yǎng)箱和冷藏室內(nèi)使用。