廣州碩譜生物科技有限公司，SPE小柱，是目前國內(nèi)生產(chǎn)SPE小柱較好的生產(chǎn)廠家。Diol固相萃取柱選擇

在選擇C18反相分離柱時(shí)，應(yīng)根據(jù)樣品情況，改變流動相的組成或溶劑強(qiáng)度，以提高分離度、選擇性或保留時(shí)間。

反相法C18在分離過程中，水可以與水-甲1醇、水-乙1腈、水-四氫呋1喃等多種有機(jī)溶1劑混合，而且分離效果也很好。適當(dāng)?shù)母牧紕?，如三?胺或乙1酸，可抑制硅膠表面殘余硅羥基的酸性，從而減少對酸或堿性組分的保留，并減少拖尾；同時(shí)，對流動相 PH值的調(diào)節(jié)，可大大改變酸性或堿性組分的選擇性。對酸性組分，流動相 PH<7時(shí)，增加色譜柱的保留時(shí)間；對堿性樣品，流動相 PH≥7時(shí)，將堿性組分分為游離型(RNH2)，極性小，保留時(shí)間增大，可在固定相和流動相之間多次分布，提高堿性組分的選擇性。

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回收率

當(dāng)一個(gè)完整的 SPE操作過程中，目標(biāo)化合物可能會出現(xiàn)在出液、淋洗、洗脫液或吸附劑中，當(dāng)“目標(biāo)物不能回收或回收率低”現(xiàn)象出現(xiàn)時(shí)，則向樣品溶液中加入標(biāo)液，然后進(jìn)行一個(gè)完整的 SPE操作，分別收集出液、淋洗液和洗脫液并進(jìn)行分析。

先確定目標(biāo)化合物存在于哪個(gè)部分，然后確定問題來自以下哪個(gè)環(huán)節(jié)：目標(biāo)化合物不能保留在吸附劑中；沒有完全洗脫；其他環(huán)節(jié)。

目標(biāo)化合物在吸附劑中保留度不足

在樣品流出液或淋洗液中發(fā)現(xiàn)5%以上的目標(biāo)化合物時(shí)，可得出“不能保留目標(biāo)化合物在吸附劑中”的結(jié)論。

2.目標(biāo)化合物未完全洗脫

在樣本溶液流出液和淋洗液中沒有出現(xiàn)目標(biāo)化合物，而在洗脫液中只出現(xiàn)少量或不出現(xiàn)目標(biāo)化合物，則判斷為“目標(biāo)物未完全洗脫”

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固相萃取柱的特點(diǎn)分為以下三類：

正相固相萃取法

固相型(填充型)：極性物質(zhì)。

分離物：極性，中極性，非極性

移動相(洗脫劑)：無極性，中極性

吸附劑與化合物之間的作用力：氫鍵、π鍵、π鍵等。

常用于正相固相萃取柱的材料有：①極性基團(tuán)結(jié)合硅膠；②極性吸附物

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固相萃取柱(英文，簡稱 SPE柱，或 Solid Phase extraction Cartridges，簡稱 SPE柱，簡稱 SPE柱)是一種從層析柱中提取、分離和濃縮樣品的前處理設(shè)備。

通常固相萃取柱大多采用聚丙1烯(PP)為材料的注射針筒裝置，其內(nèi)部裝有兩片塞片，塞片是用聚乙烯(PE)或玻璃纖維制成的，塞片的中間裝有一定量的色譜吸附劑(填料)。固相萃取柱的上端開放，下端為出液口，液體通過吸附劑從出口流出。

采用液固萃取與柱液相色譜相結(jié)合的方法。固相色譜法是一種柱色譜分離方法，在分離機(jī)理、固定相和溶劑選擇等方面與 HLPC有很多相似之處。與 HLPC相比， SPE的填充粒徑(>40μ m)為3~10μ m。所以 SPE只能用來分離保留特性差異較大的化合物。

在目標(biāo)物處于極性較弱的樣品基質(zhì)中時(shí)，可利用極性相互作用，選擇正相萃取方式；而在極性樣品環(huán)境下，則可采用反相萃取方式。采用陽離子交換機(jī)制，可將萃取過程中 pH調(diào)至低于目標(biāo)物 pKa的兩個(gè) pH單位，即 pH=2.16。研究發(fā)現(xiàn)，保留機(jī)制的選擇主要受以下幾個(gè)因素的影響：保留機(jī)制一：目標(biāo)物官能團(tuán)的性質(zhì)；保留機(jī)制二：樣品基質(zhì)的性質(zhì)。

SCX (強(qiáng)陽離子交換)是一種以單分散型、無孔聚合物微球?yàn)檩d體的高i效離子交換色譜柱，用于快速、高i效地分離分析蛋白質(zhì)和多肽。

該 SPE色譜柱具有用于無極性和中度極性化合物的高保性烷i基合成相。

離子化固相萃取技術(shù)適合于分解為帶電離子的化合物，其作用機(jī)制是在帶電的目標(biāo)化合物離子和帶電離子相反的吸附劑之間產(chǎn)生靜電吸引。試樣基質(zhì)可以是極性的，例如水溶液，也可以是非極性的有機(jī)溶液，但實(shí)際使用時(shí)用水溶液較多，如生物體液、江河湖海等天然水、廢水等。

所分析的目標(biāo)化合物必須具有下列任何一種或多種官能團(tuán)，才能通過離子力從樣品溶液中分離出來：(1)可產(chǎn)生陽離子的官能團(tuán)(帶正電荷)(2)可產(chǎn)生陰離子的官能團(tuán)(帶負(fù)電荷)，而待分析的目標(biāo)化合物必須在特定 pH環(huán)境下呈離子化或中性化。

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當(dāng)發(fā)現(xiàn)回收率下降時(shí)，收集該組分，并檢測目標(biāo)化合物是否在這一階段被洗脫。若經(jīng)調(diào)整 pH使可離子化的目標(biāo)化合物中性化，并通過疏水力被 SPE柱吸附，則洗滌時(shí)應(yīng)注意保持 pH不變，以免因 pH變化而導(dǎo)致目標(biāo)化合物在洗滌過程中丟失。

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正壓法通常是將帶一定壓力的空氣或氮?dú)鈴?SPE柱上吹走填料中的水；負(fù)壓法則是將一定真空度從萃柱下吹走殘余的水。
單獨(dú)樣品處理，可使用一個(gè)通過適配器連接到 SPE柱，推動樣品或溶劑通過 SPE柱管，如需500 mg或1 g的吸附劑柱床，可選用適配器直接與配合。自動 SPE作業(yè)，由于其優(yōu)良的結(jié)果重復(fù)性，已被廣泛使用；96孔板的 SPE裝置也是一種理想的自動化方案。該方案適用于樣品量大，需要快速處理的場合。