酵母基因組DNA提取好方法

DNA提取主要是CTAB方法，其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超聲波法、研磨法、凍融法?；瘜W(xué)方式如異硫CN酸胍法、堿裂解法。生物方式：酶法。根據(jù)核酸分離純化方式的不同有；硅質(zhì)材料、陰離子交換樹(shù)脂等。

提取基因組DNA和細(xì)胞核DNA是不同的方法

提取細(xì)胞核要先把細(xì)胞破碎分離出細(xì)胞核,要在甘油或其他保護(hù)劑中進(jìn)行

SDS十二烷基磺酸鈉：可破壞細(xì)胞膜、核膜,并使組織蛋白與DNA分離

CATB是一種抽提液,破壞細(xì)胞膜的~

DNA不溶于異丙1醇,異丙1醇可以析出DNA,產(chǎn)生白色絮狀沉淀,用槍頭挑出就可以了

植物ＤＮＡ的ＣＴＡＢ提取法：

1 稱取新鮮葉片2-3ｇ,剪碎放入研缽中,在液氮中研磨成粉末。

2 將粉末轉(zhuǎn)移到的加有7ｍｌ經(jīng)預(yù)熱的1 5×ＣＴＡＢ提取緩沖液15ｍｌ離心管中,迅速混勻后置于65℃水浴中,溫育30ｍｉｎ。

3 取出離心管,冷卻至室溫,加入氯1仿/異戊1醇(24:1),充分混勻,室溫下2300×ｇ離心20ｍｉｎ。

4 將上清轉(zhuǎn)移至另一新的15ｍｌ離心管中,加入1/10體積10%的ＣＴＡＢ和等體積的氯1仿/異戊1醇。充分混勻,2300×ｇ離心20ｍｉｎ。

5 轉(zhuǎn)移上清至另一新的15ｍｌ離心管中,加入等體積1%的ＣＴＡＢ沉淀緩沖液,輕輕搖晃至形成ＤＮＡ絮狀沉淀。1000×ｇ離心10ｍｉｎ,使ＤＮＡ沉淀于管底。

6 加入1 5-2ｍｌ的1ｍｏｌ/ＬＮａＣｌ及5μｌＲＮａｓｅ置于56℃水浴中過(guò)夜。待ＤＮＡ完全溶解后,加2-3ｍｌ4℃預(yù)冷的95%的冰乙醇使ＤＮＡ沉淀,挑出ＤＮＡ,置于1 5ｍｌ離心管中,用70%乙醇清洗30ｍｉｎ,用離心機(jī)甩5ｓ,倒出70%乙醇,再用95%乙醇浸泡5ｍｉｎ,倒出95%乙醇,在超凈工作臺(tái)上吹干。

7 將風(fēng)干的ＤＮＡ直接在4℃保存?zhèn)溆没蛉苡?00μｌＴＥ溶液中于-20℃保存。

　　核酸檢測(cè)是確診新冠肺1炎的重要標(biāo)準(zhǔn)，而檢測(cè)流程中的每一個(gè)環(huán)節(jié)都是精細(xì)活，容不得半點(diǎn)馬虎，是與病毒的正面交鋒，核酸檢測(cè)是如何“識(shí)別”病毒的？

　　從樣本核對(duì)、取樣滅活、核酸提取、體系配制、上機(jī)擴(kuò)增到zui后結(jié)果分析，核酸檢測(cè)過(guò)程復(fù)雜繁瑣，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確性需要一套嚴(yán)密流程，每一批樣本在實(shí)驗(yàn)室里至少需要4到6個(gè)小時(shí)的篩查，對(duì)于出現(xiàn)異常的樣本耗時(shí)則更長(zhǎng)，一般檢測(cè)呈陽(yáng)性的樣本，會(huì)再次復(fù)核，一般都需要8到10個(gè)小時(shí)才能完成檢測(cè)報(bào)告。