ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,這些就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性和樣品中的其它成份。

雙夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。

WST®-1不會和氧化酶的還原型發(fā)生反應(yīng),因此,能夠檢測SOD100%的抑制率。WST®-1被超氧陰離子還原的比率與氧化酶的活性線性相關(guān),并且會被SOD所抑制(見圖1)。因此,SOD或者SOD類似物的IC50(50%的抑制濃度)就能用比色法來測定。DNA提取試劑盒是根據(jù)氯化芐法構(gòu)建的,能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。具有能將含有纖維素等的細(xì)胞壁中的羥基芐基化,從而破壞細(xì)胞壁的特性。