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偏光顯微鏡物鏡的鑒別率
物鏡的鑒別率是指物鏡具有將兩個物點(diǎn)清晰分辨的能力,以兩個物點(diǎn)能清晰分辨的距離d的倒數(shù)表示。d愈小,表示物鏡的鑒別率愈高。
要明白鑒別率可以有一定的限度,這就要用光通過透鏡后產(chǎn)生衍射現(xiàn)象來解釋。物體通過光學(xué)儀器成象時,每一物點(diǎn)對應(yīng)有一象點(diǎn),但由于光的衍射,物點(diǎn)的象不再是一個幾何點(diǎn),而是有一定大小的衍射亮斑??拷膬蓚€物點(diǎn)所成的象一兩個亮斑如果互相重疊,則導(dǎo)致這兩個物點(diǎn)分辨不清,從而限制了光學(xué)系統(tǒng)的分辨本領(lǐng)一分辨率。顯然,象面上衍射圖象中央亮斑半徑愈大,系統(tǒng)的分辨本領(lǐng)愈小。
瑞利(Rayleigh)提出一個推測(又稱瑞利準(zhǔn)則):認(rèn)為當(dāng)A1′衍射花樣的值正好落在A2′衍射花樣的極大值時,A1、A2是可以分辨的,將此時定出的兩物點(diǎn)距離A1、A2作為光學(xué)統(tǒng)的分辨極限。θ0稱為極限分辨角。不言而喻,當(dāng)θ>θ0時是完全可分辨的,θ<θ0時是不可分辨的。
由圓孔衍射理論得到:θ0=1.22λ / D
式中λ──入射光波長;
D──入射光的允許孔徑(透鏡直徑)。
因?yàn)棣?很小,所以由圖2-4得:
d′≈θ0=1.22λS / D
物鏡在設(shè)計(jì)時,總是使它滿足阿貝正弦條件的,即
ndsinu=n′d′sinu′
式中n和n′為物、象所在空間的折射率,成象總是在空氣介質(zhì)中,故n′=1;u各u′分別為光線在物、象空間共軛點(diǎn)上的孔徑角;d和d′分別為物點(diǎn)、象點(diǎn)中心斑的間距。
考慮到顯微鏡中入射光并非都是平行光,有傾斜光線,對上式系數(shù)作適當(dāng)?shù)男拚允街衝sinu就是物鏡的數(shù)值孔徑,因此,上式或者寫:d=0.5λ/N.A
因此表明:物鏡的數(shù)值孔徑愈大,入射光的波長愈短,則物鏡的分辨能力愈高。在可見光中,觀察時常用黃綠光(λ ≈4400A),則可使分辨能力提高25%左右
偏光顯微鏡物鏡中心調(diào)節(jié)方法
(1)觀察旋轉(zhuǎn)工作臺上的切片,在切片中找一小黑點(diǎn),使位于目鏡十字線中心。
(2)轉(zhuǎn)動工作臺,若物鏡光軸中心O與工作臺中心不一致,黑點(diǎn)即離開十字線中心繞一個圓轉(zhuǎn)動。圓的中心S即為工作臺的中心。
(3)將小黑點(diǎn)轉(zhuǎn)至距十字線中心遠(yuǎn)的1點(diǎn)處,旋轉(zhuǎn)物鏡座上兩個調(diào)節(jié)螺絲使小黑點(diǎn)自1處移至O-1直線的中點(diǎn)(即1點(diǎn)距十字線中心距離的一半)。
(4)如此循環(huán)進(jìn)行上述三步驟可使物鏡光軸與旋轉(zhuǎn)工作臺中心重合。
在高倍鏡下看到標(biāo)本后,把需要進(jìn)一步放大的部位移至視野中心。上升鏡筒或下降載物臺約1.5厘米。將物鏡轉(zhuǎn)離光軸,在蓋玻片所要觀察的部位上滴一滴香柏油,把光闌升至。換上油鏡,小心調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋,使油鏡慢慢下降或慢慢上升載物臺,從側(cè)面觀察油鏡下端與標(biāo)本之間的距離,當(dāng)油鏡的下端開始觸及油滴時即可停止。從目鏡觀察,調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,直至看清標(biāo)本物像。
觀察完畢,上升鏡筒或下降載物臺,將油鏡轉(zhuǎn)離光軸,用干的擦鏡紙輕輕地吸掉油鏡和蓋玻片上的油,再用浸濕的擦鏡紙擦拭兩三次,后用干凈的擦鏡紙?jiān)俨潦脙扇巍?/p>
三觀察后的處理工作
清潔:顯微鏡上的污物(殘物或灰塵),用擦鏡紙擦干凈,若擦不干凈可蘸少許進(jìn)行擦拭。
顯微鏡各部分的放置:擦完后,把物鏡轉(zhuǎn)離光軸,把反光鏡轉(zhuǎn)到與載物臺垂直的方向,以減少灰塵粘落上面,而后罩上鏡套,小心的放回鏡箱內(nèi),保存?zhèn)溆谩?/p>
⒈光學(xué)部分的擦拭
順序:吸耳球吹――毛筆、刷子和羽毛輕刷――擦鏡紙輕擦——擦鏡紙蘸輕擦。
鏡頭表面發(fā)霉和發(fā)霧可用擦鏡紙蘸少量酒精混合液(3:7)輕擦。內(nèi)表面發(fā)霉和發(fā)霧,一般無法清除,所以嚴(yán)防發(fā)生。
⒉機(jī)械部分的擦拭
用干凈的軟布擦拭,或用擦鏡紙蘸輕擦,不得用酒精和,因?yàn)檫@些試劑會侵蝕油漆,容易把油漆擦掉。
防潮、防塵、防腐蝕、放熱
正交偏光顯微鏡的維護(hù)保養(yǎng)
正交偏光顯微鏡的維護(hù)保養(yǎng):
1)搬動、放置及使用顯微鏡時,動作要輕,防止震動。從鏡箱里取出顯微鏡時,必須手握鏡臂,切勿提住微動螺絲以上的任何部位。
2)鏡頭必須保持清潔,若鏡頭上有灰塵,則需用擦鏡頭的軟紙擦,切不可用手指或粗紙擦,以防損壞鏡頭。
3)顯微鏡的任何附件,應(yīng)嚴(yán)防墜地或跌落。附件用畢放回原處,禁止隨便放在桌上或夾在書中帶走。
4)不得隨便拆卸顯微鏡。
5)薄片置于載物臺上,需以彈簧夾壓緊,蓋玻片必須朝上,不得使薄片反置于載物臺上。
6)下降鏡筒時,切勿使物鏡與薄片相撞而損壞鏡頭和薄片。
7)當(dāng)校正螺絲失效時,不應(yīng)強(qiáng)力扭動,應(yīng)找人員維修。
8)用完后,應(yīng)將上偏光鏡、勃氏鏡推入鏡筒內(nèi),以免落入灰塵。在鏡筒上如有罩子則需罩上,若無,則需置一目鏡,以免灰塵掉入鏡筒內(nèi)。