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親和柱介紹
生物分子之間的親和識別包括抗體和抗原、酶和底物和受體等之間的親合作用,這些親和作用屬于生物專一性識別;此外,某些物質和生物大分子之間還有一些特異性作用,如染料和某些酶(特別是脫氫酶和激酶等),植物凝集素和糖蛋白,金屬離子和蛋白質表面的組氨酸等之間的作用,都可以應用于親和分離過程。
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親和柱性能介紹
親和柱是利用了酶聯(lián)的原理,凈化效果好,同時有富集作用。
凈化柱就是溶液從柱子過一下,利用里面的填料吸附一些雜質物質,達到一定的凈化目的,不能富集。
親和柱的填料全是采用高特異性的抗體,符合真菌毒素檢測的國際標準,回收率大于95%. 可用于飼料,食品等復雜樣品的檢測。
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親和柱親和層析過程中的注意事項
1、上樣
親和層析純化生物大分子通常采用柱層析的方法。親和層析柱一般很短,通常10cm左右。上樣時應注意選擇適當?shù)臈l件,包括上樣流速、緩沖液種類、pH、離子強度、溫度等,以使待分離的物質能夠充分結合在親和吸附劑上。
2、洗脫
親和層析的另一個重要的步驟就是要選擇合適的條件使待分離物質與配體分開而被洗脫出來。親和層析的洗脫方法可以分為兩種:特異性洗脫和非特異性洗脫。
親和柱——親和層析的用途
簡單來說,親和層析利用流動相和固定相內不同生物分子之間相互作用強度的差異來分離物質。
親和層析常見的用途是純化重組蛋白。親和層析是從粗混合物中純化蛋白質或核酸的較佳選擇。如果蛋白質的分子量,疏水性,電荷等未知,親和色譜法仍可適用于這種情況。一個典型例子是嘗試分離具有特定活性的酶時,可以用與所選底物相似或相同的連接配體構建親和柱。