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分析試劑盒配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 溫育:操作同3。 洗滌:操作同5。 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
在全自動生化分析儀使用中,我們發(fā)現(xiàn)一個項目會影響緊隨其后項目的測試結(jié)果,造成這種影響的原因之一是一種實際中含有另一試驗的測定物質(zhì)而直接干擾其測試結(jié)果。比如:在TP試劑中含有大量的CUSO4,如果將Cu放在TP項目的后面檢測,會使檢測結(jié)果偏高或重復性差。再如P放在含有磷酸鹽的項目后面,TBA放在含有膽酸鹽的項目后面都會使檢測結(jié)果偏高或重復性差。
目前將不同批號的試劑混合在一起使用的想象在檢驗中經(jīng)常發(fā)生,當然這一方面是為了節(jié)省成本,另一方面為了方便。但是不管是什么品牌、是什么試劑,由于不同批號的試劑生產(chǎn)時間不同,試劑中工具酶的活性會有差異,會發(fā)生水解的底物濃度隨時間長短也會不同。因此混在一起使用而又不定標,可能會導致檢測結(jié)果的不準確。還有如果有的試劑開瓶時間太長,空氣中的灰塵或細菌會進入瓶內(nèi),由于有的試劑含量有大量的蛋白質(zhì)和鹽,是細菌生產(chǎn)的好條件。
全自動生化分析儀屬于光學分析儀器,本質(zhì)就相當于一個分光光度計,基于物質(zhì)對光的選擇性吸收,即分光光度法,基本測量原理還是依據(jù)比爾定律。單色器將光源發(fā)出的復色光分成單色光,特定波長的單色光通過盛有樣品溶液的比色池,光電轉(zhuǎn)換器將投射光轉(zhuǎn)換為電信號后送入信號處理系統(tǒng)進行分析,計算機再根據(jù)用戶選擇的工作方式對測量數(shù)據(jù)進行處理、運算、分析、保存,打印機同時打印出相應的結(jié)果。