分析試劑盒配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 溫育：操作同3。 洗滌：操作同5。 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

就是具有自動(dòng)清洗程序的全自動(dòng)生化分析儀也有交叉污染，例如Beckman 全自動(dòng)生化分析儀CX4，它的試劑針(probe)、樣品吸樣針及反應(yīng)攪拌棒是利用高壓沖洗洗液沖洗，然后用高壓壓縮空氣吹干，有時(shí)由于洗液壓力和壓縮空氣壓力偏低，使試劑吸針、樣品針及反應(yīng)攪拌棒沖洗不干凈、吹不干，從而導(dǎo)致反應(yīng)池之間相互污染、試劑間交叉污染，是檢驗(yàn)結(jié)果偏離。另一個(gè)值得注意的問題是許多生化儀器由于長(zhǎng)期頻繁的利用，使加樣針和試劑針的磨損加重或的“特氟龍”吸頭不及時(shí)更換，使吸樣針或試劑針密封層增大，產(chǎn)生泄露現(xiàn)象也是造成樣本間及實(shí)際間項(xiàng)目污染的一個(gè)重要原因。

在全自動(dòng)生化分析儀使用中，我們發(fā)現(xiàn)一個(gè)項(xiàng)目會(huì)影響緊隨其后項(xiàng)目的測(cè)試結(jié)果，造成這種影響的原因之一是一種實(shí)際中含有另一試驗(yàn)的測(cè)定物質(zhì)而直接干擾其測(cè)試結(jié)果。比如：在TP試劑中含有大量的CUSO4,如果將Cu放在TP項(xiàng)目的后面檢測(cè)，會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏高或重復(fù)性差。再如P放在含有磷酸鹽的項(xiàng)目后面，TBA放在含有膽酸鹽的項(xiàng)目后面都會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏高或重復(fù)性差。

隨著全自動(dòng)生化分析儀的普及，“開瓶穩(wěn)定性”也隨之受到了大家的重視，但是就目前有的試劑方法學(xué)來講，還達(dá)不到人們所要求的試劑開瓶后在儀器內(nèi)放很長(zhǎng)時(shí)間不需要定標(biāo)，比如ALP、TP、GSP、等PH為堿性的試劑，開瓶后試劑會(huì)吸收空氣中的二氧化碳，使試劑本身的PH值下降，如果長(zhǎng)時(shí)間開瓶不定標(biāo)或者校準(zhǔn)，會(huì)使檢測(cè)結(jié)果發(fā)生偏離，在國(guó)外有的項(xiàng)目有明文規(guī)定，必須72小時(shí)之內(nèi)定標(biāo)，比如BUN。但是在國(guó)內(nèi)的某些實(shí)驗(yàn)室為了方便，很長(zhǎng)時(shí)間都不作校準(zhǔn)，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的不準(zhǔn)確，解決辦法：a、了解試劑特性。及時(shí)對(duì)部份項(xiàng)目進(jìn)行校準(zhǔn)，對(duì)于每天標(biāo)本量不多的醫(yī)院，可按照1-2天的用量取用試劑放入儀器。