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冷凍食品加工公司熒光定量PCR給您好的建議

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發(fā)布時間:2020-08-25 05:06  






廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括:非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測試劑盒。③安全無毒,不使用傳統(tǒng)方法中的氯i仿等有毒試劑,對實驗操作人員的傷害減少到最少,完全符合現(xiàn)代環(huán)保理念。我們的客戶對象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場、養(yǎng)豬場、屠宰場、生豬屠宰場。

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一、在動物檢疫中對生豬及其產(chǎn)品開展非洲病毒檢測,應(yīng)當(dāng)使用我部批準(zhǔn)或經(jīng)中國動物疫病預(yù)防控制中心比對符合要求的檢測方法及檢測試劑盒(試紙條),確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確。廣州勱博--養(yǎng)殖場熒光定量PCR相對常規(guī)PCR而言,熒光定量PCR的主要優(yōu)點是準(zhǔn)確地確定初始模板拷貝數(shù)和寬的動態(tài)范圍內(nèi)和高的靈敏度。符合要求的檢測方法及檢測試劑盒(試紙條)可從中國動物疫病預(yù)防控制中心網(wǎng)站查詢。二、應(yīng)急期間,比對符合要求的檢測試劑盒(試紙條)可使用至2019年6月30日。三、各地畜牧獸醫(yī)管理部門要加強對非洲病毒檢測試劑盒(試紙條)生產(chǎn)企業(yè)及其產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)管,確保產(chǎn)品質(zhì)量符合要求。


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豬肉制品加工企業(yè)在生豬產(chǎn)品原料中檢出非洲病毒核酸陽性的,應(yīng)當(dāng)立即封存陽性樣品的同批次原料并報告所在地市場監(jiān)管、畜牧獸醫(yī)部門,并將陽性樣品送至具有檢測資質(zhì)的單位復(fù)檢。廣州勱博--冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠核酸提取純化一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。復(fù)檢為陽性的,企業(yè)要在當(dāng)?shù)厥袌霰O(jiān)管、畜牧獸醫(yī)部門監(jiān)督下,按規(guī)定對同批次生豬產(chǎn)品原料進行無害化處理,對相關(guān)場所進行徹i底清洗消毒。


廣州勱博儀器有限公司產(chǎn)品服務(wù)包括:非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統(tǒng)、病毒核酸提取系統(tǒng)、非洲病毒快速檢測試劑盒。而熒光定量PCR可以在反應(yīng)進行過程中進行累積擴增產(chǎn)物的分析和檢測,即“實時”。我們的客戶對象是食品企業(yè)/公司/廠、食品加工企業(yè)/公司/廠、冷凍食品加工企業(yè)/公司/廠、養(yǎng)殖場、養(yǎng)豬場、屠宰場、生豬屠宰場。

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一般情況下,高溫消毒時,60℃就可以將多數(shù)病原殺滅,但汽i油噴燈溫度達(dá)幾百度,噴燈火焰一掃而過,也不會殺滅病原,因時間太短。蒸煮消毒:在水開后30分鐘卻可以將病原殺i死。自動化操作提高了工作效率,反應(yīng)快速、重復(fù)性好、靈敏度高、特異性強、結(jié)果清晰。紫外線照射:必須達(dá)到5分鐘以上。注意:這里說的時間,不單純是消毒所用的時間,更重要的是病原體與消毒i藥接觸的有效時間。因為病原體往往附著于其他物質(zhì)上面或中間,消毒i藥與病原接觸需要先滲透,而滲透則需要時間,有時時間會很長。

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消毒i藥在殺滅病原的同時往往自身也被破壞,一個消毒i藥分子可能只能殺i死一個病原,如果一個消毒i藥分子遇到五個病原,再好的消毒i藥也不會有效果。廣州勱博--博日養(yǎng)豬場全自動核酸提取純化系統(tǒng)實時熒光定量PCR的基本原理:理論上,PCR過程是按照2n(n代表PCR循環(huán)的次數(shù))指數(shù)的方式進行模板的擴增。關(guān)于消毒i藥的用量,一般是每平方米面積用1升藥液。生產(chǎn)上常見到的則是不經(jīng)計算,只是在消毒i藥將舍內(nèi)全部噴濕即可,人走后地面馬上干燥,這樣的消毒效果是很差的,因為消毒i藥無法與掩蓋在深層的病原接觸。


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一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。分子遺傳學(xué)診斷技術(shù)多以遺傳物質(zhì)DNA為檢測對象,不需要進行細(xì)胞培養(yǎng),為傳統(tǒng)的細(xì)胞染色體核型分析技術(shù)提供了有效的補充。在熒光背景信號階段,擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋, 無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值.

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什么是熒光定量PCR?常規(guī)PCR中,擴增產(chǎn)物(擴增子)是通過終點法來分析檢測,即PCR反應(yīng)結(jié)束后,DNA通過瓊脂糖凝膠電泳,然后進行成像分析。而熒光定量PCR可以在反應(yīng)進行過程中進行累積擴增產(chǎn)物的分析和檢測,即“實時”。廣州勱博--養(yǎng)殖場核酸提取純化在PCR反應(yīng)早期,產(chǎn)生熒光的水平不能與背景明顯地區(qū)別,而后熒光的產(chǎn)生進入指數(shù)期、線性期和最終的平臺期,因此可以在PCR反應(yīng)處于指數(shù)期的某一點上來檢測PCR產(chǎn)物的量,并且由此來推斷模板最i初的含量。在反應(yīng)體系中加入熒光分子,通過熒光信號的按比例增加來反應(yīng)DNA量的增加,使PCR產(chǎn)物的實時檢測成為可能。滿足實驗?zāi)康牡臒晒饣瘜W(xué)物質(zhì)包括DNA結(jié)合染料和熒光標(biāo)記的序列特異引物或探針;專門的熱循環(huán)儀配備熒光檢測模塊,用于監(jiān)測擴增時的熒光,檢測到的熒光信號反映了每個循環(huán)擴增產(chǎn)物的量。


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相對定量可以對每個樣本中模版的其實水平之間的差異進行精i確比較,沒必要知道模版的確切拷貝數(shù),并且樣本模板中的相對水平不用使用標(biāo)準(zhǔn)曲線就可以確定。相對定量分析以實時PCR方式執(zhí)行,在實時PCR分析過程中,PCR基因擴增一直在監(jiān)控中,在PCR進行期間進行數(shù)據(jù)采集,而不是在PCR結(jié)束時(終點PCR)才獲取數(shù)據(jù)。在real-timeQ-PCR中,對整個PCR反應(yīng)擴增過程進行了實時的監(jiān)測和連續(xù)地分析擴增相關(guān)的熒光信號,隨著反應(yīng)時間的進行,監(jiān)測到的熒光信號的變化可以繪制成一條曲線。在實時PCR中,反應(yīng)是在目標(biāo)的擴增早被監(jiān)測到時用循環(huán)中的時間點來描述的,而不是在PCR結(jié)束時通過目標(biāo)的累計數(shù)來描述。

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在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料非特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結(jié)合,因此可以通過溶解曲線,確定PCR反應(yīng)是否特異?;蛘吒鶕?jù)實際情況,在生豬進場前以生豬運輸車輛為單位采集全部生豬血液樣品,混合后進行檢測。


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