做親和柱時(shí)，使用Sepharose 4B 和 Sepharose CL-4B有何不同？

Sepharose 4B指4%的瓊脂糖

Sepharose CL-4B指4%高度鉸鏈的瓊脂糖

他們的區(qū)別在于鉸鏈程度不一樣，在親和層析色譜中，介質(zhì)鉸鏈程度越高，化學(xué)穩(wěn)定性就應(yīng)該越高。這樣就可以耐受更加苛刻條件洗脫而偶聯(lián)的配基不會(huì)脫落。越是硬質(zhì)的介質(zhì)，耐受的流速也會(huì)越高。這樣更節(jié)省平衡洗脫的時(shí)間。

親和柱——親和層析原理

親和層析原理：利用生物分子之間的專(zhuān)一性識(shí)別性或特定的相互作用的分離技術(shù)稱(chēng)為親和分離技術(shù)。在該技術(shù)中，親和分離過(guò)程是通過(guò)引入親和配基得以實(shí)現(xiàn)的。所謂親和配基，是指具有對(duì)生物分子專(zhuān)一識(shí)別性或特異相互作用的物質(zhì)。將親和配基固定在不同的介質(zhì)上，可得到不同的親合分離技術(shù)，如固定在層析介質(zhì)上，達(dá)到專(zhuān)一性層析分離的技術(shù)稱(chēng)為親和層析技術(shù)。將親和配基接在分離膜上，得到親和膜分離技術(shù)。

親和柱——原理介紹

親和柱的功能基于抗原與抗體間可逆的特異性結(jié)合反應(yīng)，使其可從復(fù)雜樣品基質(zhì)中特異性地回收目標(biāo)化合物。上樣后，柱中以共價(jià)鍵形式偶聯(lián)在凝膠上的抗體會(huì)與抗原（即目標(biāo)化合物）特異性結(jié)合，雜質(zhì)不會(huì)被結(jié)合，大部分隨樣品溶液流出小柱。通過(guò)淋洗的方式除去小柱內(nèi)剩余雜質(zhì)后，使用其他洗脫液（根據(jù)對(duì)應(yīng)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)選擇）進(jìn)行洗脫即可得到潔凈的目標(biāo)化合物溶液，可直接用于后續(xù)檢測(cè)。

親和柱介紹

目前，專(zhuān)用于黃曲霉毒素分離純化的固相萃取產(chǎn)品有兩類(lèi):

二是多功能凈化柱(MFC)它是一種特殊的SPE柱，以極性、非極性及離子交換等兒類(lèi)基團(tuán)組成填充劑，可選擇性吸附樣液中的脂類(lèi)、蛋白類(lèi)等雜質(zhì)，AFT不被吸附而直接通過(guò)，MFC的操作更為簡(jiǎn)便，不需要進(jìn)行活化、淋洗和洗脫操作只需直接上樣，10秒鐘內(nèi)即可完成整個(gè)凈化過(guò)程，凈化效果理想。