廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國(guó)紐約留學(xué)，歸國(guó)創(chuàng)立了聯(lián)方。公司主營(yíng)：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。我們的服務(wù)范圍：1、 亞速旺廣州代理。其實(shí)很簡(jiǎn)單，就是在我反向沖洗前沒有把管路中的污染物沖洗干凈就直接接了柱子。2、 美國(guó)精騏有限公司廣州一級(jí)代理。3、 丹麥CAPP、波蘭RADWAG合作伙伴。4、 博納艾杰爾、美國(guó)飛諾美Phenomenex廣東代理。5、 代理環(huán)凱、BD、梅里埃等微生物試劑。6、 提供國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口的玻璃、色譜耗材，3M、杜邦等防護(hù)產(chǎn)品。7、 代理中檢所、計(jì)量院、USP、TRC、DR、ES、Bepure、first standard。8、 定制各種實(shí)驗(yàn)分析檢測(cè)玻璃裝置，定制各種實(shí)驗(yàn)異形裝置。

液相色譜柱使用問題解析

氨基柱在進(jìn)酸性樣品時(shí)，很傷柱子，如使用一段時(shí)間后，柱效降低，峰形改變，如何恢復(fù)？

答：氨基柱測(cè)酸性樣品，應(yīng)該是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能會(huì)使略帶負(fù)電荷的氨基官能團(tuán)質(zhì)子化，導(dǎo)致使用一段時(shí)間后對(duì)于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。gao效液相色譜儀色譜柱在色譜分析系統(tǒng)中主要起著分離檢測(cè)物質(zhì)的作用，如同色譜系統(tǒng)的心臟，同時(shí)也是易損耗品。建議：用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0％NH3的yi腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗后當(dāng)然要再用不含堿的流動(dòng)相洗去多余氨)，之后再進(jìn)行分析這類酸性分析物時(shí)建議在流動(dòng)相中略微添加少許氨如0.1％。

色譜柱的技術(shù)都有哪些？比如封尾等，這些技術(shù)在應(yīng)用時(shí)都體現(xiàn)在哪里？

答：色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料技術(shù)自不待言，填料的好壞對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。聚合物基質(zhì)：聚合物調(diào)料多為聚ben乙烯-二乙烯基ben或聚jia基丙酸酯等，其主要優(yōu)點(diǎn)是在PH值為1～14均可使用。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡(jiǎn)單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長(zhǎng)度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門藝術(shù)，需要經(jīng)驗(yàn)積累。

國(guó)內(nèi)和國(guó)外想比，我認(rèn)為色譜柱的差距在于：國(guó)內(nèi)公司以前都不會(huì)自己開發(fā)填料，一般買國(guó)外現(xiàn)成填料裝柱，買到的填料質(zhì)量控制權(quán)不在自己手里。另外因?yàn)檠b柱歷史短，經(jīng)驗(yàn)積累少，裝柱工藝也沒有完全達(dá)到國(guó)外水平。冠醚型：冠醚類固定相用于分離一級(jí)胺，一級(jí)胺必須質(zhì)子化方能達(dá)到分離。另外，對(duì)色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎(chǔ)材料-----裸硅膠，國(guó)產(chǎn)的還不過關(guān)，在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國(guó)外產(chǎn)品相比，差距很大。

Kinetex液相色譜柱-HPLC 的核-殼優(yōu)勢(shì)

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廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國(guó)紐約留學(xué)，歸國(guó)創(chuàng)立了聯(lián)方。反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng)，通常為水，緩沖液與jia醇，已腈等混合物。中西結(jié)合的管理理念，自強(qiáng)不息、開拓進(jìn)取、勤勉擔(dān)當(dāng)，致力于把聯(lián)方打造成一個(gè)百年品牌、一個(gè)z專業(yè)的一站式實(shí)驗(yàn)室采購(gòu)平臺(tái)，追求質(zhì)量、追求服務(wù)、追求和創(chuàng)新。科學(xué)化、精細(xì)化、專業(yè)化。 我們有及時(shí)的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。公司主營(yíng)：Luna色譜柱，美國(guó)飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱，手性色譜柱，Lux多糖類手性色譜柱等等

液相色譜柱的分類(按色譜固定相基質(zhì)分)

1.硅膠基質(zhì)：

1.1反相色譜柱：

反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ)，表面鍵合有極性相對(duì)較弱的官能團(tuán)的鍵合相。反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng)，通常為水，緩沖液與jia醇，已腈等混合物。當(dāng)這些被吸附的樣品成分累積到一定程度足以使之形成新的固定相而改變分離機(jī)理，以致樣品保留時(shí)間會(huì)波動(dòng)，會(huì)出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)組合z先被沖出，而極性弱的組份會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。

1.2正相色譜：

正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)，以及其他具有極性官能團(tuán)，如胺基團(tuán)(NH2,APS)和qing基團(tuán)(CN，CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的極性較強(qiáng)，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小，即極性強(qiáng)弱的組份z先被沖洗出色譜柱。HPLC的核-殼優(yōu)勢(shì)立即改善5μm和3μm方法利用Kinetex5μm核-殼技術(shù)，立即提升您當(dāng)前的3μm和5μmHPLC方法的分離度、生產(chǎn)率和靈敏度。正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低，如：正yi烷(Hexane),l仿(Chloroform),二氯jia烷(Methylene Chloride)等。

1.3離子交換色譜柱：

以磺化交聯(lián)強(qiáng)陰/陽(yáng)離子鍵合硅膠色譜柱，常用規(guī)格：強(qiáng)陰離子色譜柱(SAX)，強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱(SCX)

2.聚合物基質(zhì)：

聚合物調(diào)料多為聚ben乙烯-二乙烯基ben或聚jia基丙酸酯等，其主要優(yōu)點(diǎn)是在PH值為1～14均可使用。相對(duì)與硅膠基質(zhì)的C18填料，這類填料具有更強(qiáng)的疏水性；大孔的聚合物填料對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。填料方法的前三種都是濕法嗎，能不能對(duì)四種填充方法做一個(gè)簡(jiǎn)短的說明。現(xiàn)在的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料，色譜柱柱效較低。

所有聚合物基質(zhì)在流動(dòng)相發(fā)生變化時(shí)都會(huì)出現(xiàn)膨脹或收縮。用于HPLC的高交聯(lián)度聚合物填料，其膨脹和收縮要有限制。色譜柱的流向不能改變?cè)谖覀兂Ｒ?guī)思維中，色譜柱上標(biāo)示的流向是不可改變的，每次使用都要遵循。溶劑或小分子容易滲入聚合物基質(zhì)中，因?yàn)樾》肿釉诰酆衔锘|(zhì)中的傳質(zhì)比在陶瓷性基質(zhì)中慢，所以造成小分子在這種基質(zhì)中柱效低。對(duì)于大分子像蛋白質(zhì)或合成的高聚物，聚合物基質(zhì)的效能比得上陶瓷性基質(zhì)。因此，聚合物基質(zhì)廣泛用于分離大分子物質(zhì)。

3.其他無(wú)機(jī)填料：

其它HPLC的無(wú)機(jī)填料色譜柱也已經(jīng)商品化。由于其特殊的性質(zhì)，一般于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐漸成為反相色譜填料。廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營(yíng)：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。這種填料的分離不同與硅膠基質(zhì)烷ji鍵合相，石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ)，不再需其它的表面改性，該柱填料一般比烷ji鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強(qiáng)，石墨化碳可用于分離某些幾何導(dǎo)構(gòu)體，又由于HPLC流動(dòng)相中不會(huì)被溶解，這類柱可在任何PH與溫度下使用。氧化鋁也可用于HPLC，氧化鋁微粒剛性強(qiáng)，可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床，其優(yōu)點(diǎn)是可在PH高達(dá)12的流動(dòng)相中使用。但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強(qiáng)，應(yīng)用范圍受到一定的限制，所以未能廣泛應(yīng)用，新型氧化鋯填料也可用于HPLC，商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱，應(yīng)用PH范圍1～14，溫度可達(dá)100℃。由于氧化鋯填料幾年才開始研究，加之面臨的實(shí)驗(yàn)難度，其重要用途與優(yōu)勢(shì)尚在進(jìn)行中。

LuxAMP 手性液相色譜柱

對(duì)尿液中的jia基ben丙胺和ben丙胺對(duì)映體進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的手性分離

Lux 3μm AMP 是一款專為ben丙胺和取代ben丙胺（包括jia基ben丙胺）的手性分析而開發(fā)和測(cè)試的獨(dú)特液相色譜填料。一旦確定樣品中存在ben丙胺或jia基ben丙胺，便可輕松實(shí)現(xiàn)對(duì)映體確認(rèn)。

不受常見干擾物的影響

Lux 3μm AMP 的另一個(gè)顯著優(yōu)勢(shì)是，在分離ben丙胺和jia基ben丙胺對(duì)映體時(shí)不會(huì)受到下列常見的zhi療和成分的影響。此外，LuxAMP 色譜柱的分離能力也有助于分離取代ben丙胺的對(duì)映體

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區(qū)，是集技術(shù)和銷售于一體的企業(yè)。聯(lián)方的創(chuàng)始人在美國(guó)紐約留學(xué)，歸國(guó)創(chuàng)立了聯(lián)方。公司主營(yíng)：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。我們的服務(wù)范圍：1、 亞速旺廣州代理。使用更短的Kinetex色譜柱顯著提升現(xiàn)有方法的生產(chǎn)率和性能，同時(shí)減少溶劑消耗。2、 美國(guó)精騏有限公司廣州一級(jí)代理。3、 丹麥CAPP、波蘭RADWAG合作伙伴。4、 博納艾杰爾、美國(guó)飛諾美Phenomenex廣東代理。5、 代理環(huán)凱、BD、梅里埃等微生物試劑。6、 提供國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口的玻璃、色譜耗材，3M、杜邦等防護(hù)產(chǎn)品。7、 代理中檢所、計(jì)量院、USP、TRC、DR、ES、Bepure、first standard。8、 定制各種實(shí)驗(yàn)分析檢測(cè)玻璃裝置，定制各種實(shí)驗(yàn)異形裝置。

Synergi選擇性液相色譜柱

Synergi Fusion-RP

C18 極性嵌入式

均衡的極性與非極性性能

嵌入式極性基團(tuán)

使 C18 固定相同時(shí)具有極性

選擇性

TMS 封尾

確保色譜峰尖

Synergi Max-RP

C12 TMS 封尾

適用于中性 pH 下分析堿性化合物

高密度配體和大量的封尾可確

保尖銳峰型

手性色譜柱

配位交換型：

手性配位交換色譜（Chiral LigandExchange Chromatography，CLEC）Davankov發(fā)明，是通過形成光學(xué)活性的金屬絡(luò)合物而達(dá)到手性分離，屬于Irving Wainer分類中的第4類手性固定相，主要用于分離氨基酸類。資料顯示：在正常條件下，填料粒度＞20μm時(shí)，干法填充制備柱較為合適。

由于此類固定相是由手性氨基酸—銅離子絡(luò)合物鍵合到硅膠或聚合物上形成，因此流動(dòng)相中必須含有銅離子以保證手性固定相上的銅離子不至流失。其它的過渡金屬元素也已用于手性配位交換色譜，但銅離子應(yīng)用廣。形成絡(luò)合物的過程十分緩慢，因此有時(shí)需提高柱溫，z佳溫度約50℃。高含碳量進(jìn)步柱容量、分辨率及分析時(shí)間，用于要求高分離度的復(fù)雜樣品。手性配位交換色譜僅對(duì)α- 氨基酸和其類似物有效。β- 氨基酸很難用手性配位交換色譜得以分離。手性配位交換色譜可用于制備，由于流動(dòng)相中存在銅離子，雖然銅離子能用離子交換柱除去，但增加了樣品處理的困難。

廣州聯(lián)方實(shí)驗(yàn)器材有限公司主營(yíng)：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實(shí)驗(yàn)室和生產(chǎn)需要的玻璃耗材、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、實(shí)驗(yàn)器材、色譜耗材和生物耗材，是quan面的實(shí)驗(yàn)室一體化采購(gòu)平臺(tái)。gao效液相色譜柱是消耗品，會(huì)隨使用時(shí)間或進(jìn)樣的次數(shù)增加，出現(xiàn)色譜峰高降低，峰寬加大或出現(xiàn)肩峰，柱效下降。我們本著嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的創(chuàng)業(yè)精神，為您提供價(jià)格優(yōu)惠、質(zhì)量保證的產(chǎn)品。我們有及時(shí)的送貨服務(wù)，準(zhǔn)確而快捷地滿足您的需要。

Synergi Fusion-RP極性嵌入式 C18 色譜柱

均衡的極性和疏水保留可提供的選擇性

疏水堿性化合物

所有色譜柱的條件：

色譜柱： Synergi 4 μm Fusion-RP

典型 C18

規(guī)格： 150 x 4.6mm

流動(dòng)相： 20mM 磷酸鉀溶液

(pH 2.5)/yi腈 (75:25)

流速： 1.0mL/min

檢測(cè)： UV / 210 nm

樣品： 1. 馬來酸

2. 氯ben那敏

3. 曲普利啶

4. ben海拉明

手性色譜柱能否用純水沖洗？沖洗后會(huì)有什么影響？

用純水短時(shí)間內(nèi)沖洗色譜柱，通常不會(huì)對(duì)色譜柱造成較大的損傷，但如果長(zhǎng)時(shí)間用水沖洗色譜柱則可能引起固定相流失和相塌陷現(xiàn)象，所以若非必要請(qǐng)盡量避免用純水沖洗色譜柱，建議在水中加入一定量的jia醇或yi腈進(jìn)行沖洗，通常水的含量<90%不會(huì)對(duì)色譜柱造成任何影響。如果你認(rèn)為流動(dòng)相比例無(wú)法把色譜柱沖洗干凈或者此比例中有機(jī)系占有比例過大，你可以使用內(nèi)含10%左右的純水來沖洗。

原因分析：首先，由于目前所用的色譜柱大多以硅膠為基質(zhì)，硅膠的溶解特點(diǎn)是在純水中的溶解度比在含有一定濃度有ji溶劑的流動(dòng)相中要大得多，所以長(zhǎng)時(shí)間的用純水沖洗會(huì)導(dǎo)致固定相的流失，引起柱效下降。其次，對(duì)于常規(guī)的 C18 柱而言，由于C18 長(zhǎng)鏈與水是不互溶的，C18 長(zhǎng)鏈之間的相互作用力大于C18 與水分子的作用力，長(zhǎng)時(shí)間的用水沖洗，使得C18 長(zhǎng)鏈之間相互靠近，水流的沖刷，導(dǎo)致相互聯(lián)結(jié)的C18 長(zhǎng)鏈倒伏在硅膠基質(zhì)的表面，對(duì)疏水性物質(zhì)的保留能力下降，即相塌陷。特點(diǎn)：更新的HPLC技術(shù)PH1-12寬廣PH穩(wěn)定性增強(qiáng)了化學(xué)穩(wěn)定性，與聚合物型填料色譜柱類似保留了硅膠基質(zhì)填料色譜柱的高柱效和高耐壓性延長(zhǎng)柱壽命。針對(duì)用純水沖洗容易出現(xiàn)相塌陷的現(xiàn)象，有些廠家推出了純水柱，這種純水柱可以用純水作流動(dòng)相而不會(huì)產(chǎn)生相塌陷，這對(duì)只溶于純水的樣品的分析提供了一個(gè)很好的選擇。