熒光定量PCR儀的原理

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為了便于對(duì)所檢測(cè)樣本進(jìn)行比較，在real-time Q-PCR反應(yīng)的指數(shù)期，首先需設(shè)定一定熒光信號(hào)的域值，一般這個(gè)域值（threshold）是以PCR反應(yīng)的前15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)作為熒光本底信號(hào) （baseline），熒光域值的缺省設(shè)置是3～15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。如果檢測(cè)到熒光信號(hào)超過(guò)域值被認(rèn)為是真正的信號(hào)，它可用于定義 樣本的域值循環(huán)數(shù)（Ct）。

熒光定量PCR的病原體檢測(cè)

目前，采用熒光定量PCR檢測(cè)技術(shù)可以對(duì)解脲支原體、人類瘤病毒、單純病毒、肝的病毒、病毒、EB病毒和巨細(xì)胞病毒等病原體進(jìn)行定量測(cè)定。與傳統(tǒng)的檢測(cè)方法相比具有靈敏度高、取樣少、快速簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。如：菌基因診斷的意義主要表現(xiàn)在：a.區(qū)分TB；b.檢測(cè)TB耐藥基因；c.提高TB的陽(yáng)性檢出率。

熒光定量PCR儀的產(chǎn)前診斷應(yīng)用

到目前為止，人們對(duì)遺傳性物質(zhì)改變引起的遺傳性疾病還無(wú)法治，只能通過(guò)產(chǎn)前監(jiān)測(cè)，減少病嬰出生，以防止各類遺傳性疾病的發(fā)生，如為減少X連鎖遺傳病患兒的出生，從孕婦的外周血中分離胎兒DNA，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)其Y性別決定區(qū)基因是一種無(wú)創(chuàng)傷性的方法，易為孕婦所接受。