低溫生物菌種的影響因素有哪些

菌的質(zhì)量：保藏的菌種應(yīng)培養(yǎng)在營養(yǎng)豐富的條件下，使之進(jìn)入穩(wěn)定期，稍老一些的菌體對(duì)環(huán)境抵抗力強(qiáng)。另處，作為冷凍干燥的菌懸液細(xì)胞濃度要高不同的菌對(duì)冷凍干燥的耐受程度不同，如果保存的菌液細(xì)胞濃度不高，就會(huì)使以后傳種造成困難，保存期也會(huì)受到影響。

保護(hù)劑：不同種類的保護(hù)劑對(duì)不同微生物的作用是不同的，如個(gè)別菌種在脫脂乳作保護(hù)劑的情況下失敗率高達(dá)99.99%，而采用葡聚糖等混和保護(hù)劑時(shí)失敗率大大減少。一般情況下，那些容易保存的菌種對(duì)保護(hù)劑的要求不很嚴(yán)格，而不易保存的菌種對(duì)保護(hù)劑的要求卻很苛刻。因此，選擇好的保護(hù)劑是冷凍干燥保存菌種的關(guān)鍵因素。

干燥速度：實(shí)驗(yàn)表明，慢速干燥比快速干燥存活率高，如青霉菌6h干燥存活率為67.3%，而3h為59%。

空氣的影響：冷凍干燥后空氣對(duì)細(xì)菌細(xì)胞影響較大，可導(dǎo)致細(xì)胞損傷進(jìn)而失敗，故在凍干后應(yīng)立即在真空下融封，才有利于長期保存。

溫度的影響：在干燥和真空狀況下溫度的影響遠(yuǎn)沒有上述幾項(xiàng)因素重要，因此可以在室溫下保存，但許多微生物在4℃保存的存活率要比在室溫下高1倍。

含水量的影響：水分含量過高對(duì)菌存活不利，完全脫水也不利于保存，一般把干燥后的細(xì)胞含水量控制在3%以下(1%-3%)

低溫生物菌種的工藝介紹

現(xiàn)有生化工藝有活性污泥法、生物接觸氧化、MBBR、MBR等，這些工藝在常溫下均可實(shí)現(xiàn)氨氮的有效去除并達(dá)標(biāo)，這時(shí)好氧系統(tǒng)中占主導(dǎo)地位的是中溫（微生物）硝化菌，硝化菌分自養(yǎng)硝化細(xì)菌和異樣硝化菌。

自養(yǎng)硝化菌生長繁殖緩慢，在活性污泥系統(tǒng)中無法與異養(yǎng)細(xì)菌競(jìng)爭(zhēng)，難以維持較高的細(xì)胞濃度，需要保持較長的污泥停留時(shí)間來取得較好的脫氮效果，易受外界環(huán)境影響，對(duì)環(huán)境沖擊尤其是毒物沖擊非常敏感，硝化系統(tǒng)很容易崩潰，要經(jīng)常不斷的馴化和培養(yǎng)。

低溫生物菌種的使用溫度

普通硝化細(xì)菌在溫度低于15°C時(shí)，活性大幅度降低，硝化速度也明顯下降，溫度低于5°C時(shí)，普通硝化細(xì)菌的生命活動(dòng)幾乎停止，處于休眠狀態(tài)，普通中溫微生物適合生長溫度為25~37℃，目前污水處理廠的處理工藝大都可實(shí)現(xiàn)15°C左右氨氮達(dá)標(biāo)排放，當(dāng)溫度低于12°C時(shí)，中溫菌的活性大大降低，甚至沒有繁殖功能，使得污水廠COD、氨氮和磷處理效果變差，出水無法達(dá)標(biāo)排放，投加COD去除劑，氨氮去除劑，除磷劑等化學(xué)絮凝劑或氧化劑，在增加污水廠運(yùn)營成本的同時(shí)，又形成了二次污染。

低溫生物菌種的保存方法有哪些？

（一）培養(yǎng)基保存法

利用各種斜面和半固體培養(yǎng)基，加上石蠟油保存菌種，是一種簡易的保存方法。

1.普通瓊脂斜面保存法：腸道菌、等一般細(xì)菌可接種于不含糖的普通瓊脂斜面上，斜面底部應(yīng)加少許無糖肉膏湯，以防干涸。經(jīng)35℃培養(yǎng)18～24h后，移種于4℃冰箱中，一般可保存一個(gè)月，每月傳代一次。

2.血液瓊脂斜面保存法：鏈球菌、應(yīng)接種于血液瓊脂斜面上，35℃培養(yǎng)生長后，置4℃冰箱中保存，鏈球菌須半個(gè)月至1個(gè)月移種一次，新分離菌株須2～4天移種一次，以后逐漸延長移種時(shí)間，在適應(yīng)后可延至半個(gè)月移種一次。

3.巧克力色斜面保存法：宜保存菌，并在35℃孵箱中保存，一般每2天移種一次。

4.雞蛋斜面保存法：適于保存含有Vi抗原的沙門菌屬及其他含表面抗原的細(xì)菌，一般可保存一個(gè)月。

5.半固體穿刺保存法：將細(xì)菌接種于瓊脂半固體或瓊脂半固體內(nèi)，經(jīng)35℃培養(yǎng)18～24h，再以無菌方法加入滅菌的液體石蠟。高度約lcm，置4℃冰箱保存。保存時(shí)間可達(dá)3～6個(gè)月。

（二）干燥保存法

原理是將細(xì)菌體內(nèi)的水分蒸發(fā)掉，使其處于休眠和代謝停滯狀態(tài)，從而達(dá)到長期保存菌種的目的醫(yī)|學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理。菌種干燥后低溫保存，可保存數(shù)年至十幾年。

（三）冷凍干燥保存法

本法又稱冷凍真空干燥法。它綜合利用了各種有利于菌種保存的因素（低溫、干燥和缺氧等），是目前有效的菌種保存方法之一。用本法保存的菌種具有成活率高，變異性小等優(yōu)點(diǎn)，保存期一般3～5年，有的可長達(dá)10年以上。

（四）脫脂牛奶保存法

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