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工業(yè)制備色譜
蛋白質(zhì)的特定構(gòu)象對蛋白質(zhì)的生物功能起決定性的作用。而幾乎所有的蛋白質(zhì)必須與其他分子相結(jié)合才能發(fā)揮其功能和作用。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)的構(gòu)象發(fā)生變化,例如通過加熱或化學(xué)試劑處理等使多肽鏈的盤繞和折疊被解開,其空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化, 則蛋白 質(zhì)變性, 其功能和生物活性即喪失,作為現(xiàn)代生物科技的主要產(chǎn)品類型,蛋白質(zhì)是結(jié)構(gòu)和功能非常復(fù)雜的大分子。
蛋白質(zhì)的特點(diǎn)使得其分離過程與傳統(tǒng)化工分離過程有著極為不同的特點(diǎn):(1)分離對象是具有特定的生物活性的生物大分子產(chǎn)品,分離過程設(shè)計(jì)中不恰當(dāng)?shù)奈锢砗突瘜W(xué)環(huán)境等(如溫度、PH值、緩沖液選擇、、攪拌和剪切力等)皆有可能引起其蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而使之失活;(2)由于發(fā)酵液、細(xì)胞培養(yǎng)液或勻漿液中,我們所需要的目標(biāo)產(chǎn)物往往存在于含有許多性質(zhì)十分相似的雜質(zhì)的稀溶液中,如何從這樣一種復(fù)雜的稀溶液中經(jīng)濟(jì)有效地提取產(chǎn)物是生物分離技術(shù)面臨的重大課題;(3)從衛(wèi)生和安全角度出發(fā),對于用基因工程產(chǎn)品,有著極高的純度和同一性要求,對其中的有害雜質(zhì)去除率要求極高,對分離設(shè)備材質(zhì)和分離過程中引入的分離介質(zhì)也有著嚴(yán)格的限制。
用于制備和生產(chǎn)的大規(guī)模生物分離技術(shù)所面臨的問題是:如何在不破壞目標(biāo)蛋白質(zhì)的生物活性的前提下(溫和的條件),以很高的識別性,以及較高的分離能力和收率,經(jīng)濟(jì)有效地從稀溶液中提取、分離、純化目標(biāo)產(chǎn)物。吸附通??梢栽诔?、水相、適當(dāng)?shù)膒H、離子強(qiáng)度、避免使用等有害的化學(xué)試劑等溫和的條件下操作,液相色譜具有很高的分離性能,適合于生物分離過程的要求。