廣州碩譜生物科技有限公司氧化鋁SPE柱價格

SPE小柱的應用原理

固相萃取(SPE)技術(shù)是隨著樣品預處理要求的逐漸提高而被廣泛應用的。樣品經(jīng)選擇性吸附和洗脫后，進行富集分離。通常采用的方法是使液體樣品經(jīng)過吸附劑，保留其中的被測物質(zhì)，然后選擇適當強度的溶劑沖去雜質(zhì)，然后用少量的溶劑對被測物質(zhì)進行洗脫，從而實現(xiàn)快速分離、凈化和濃縮。還可以選擇性地吸附干擾雜質(zhì)，讓被測物質(zhì)外流；或者同時吸附雜質(zhì)和被測物質(zhì)，再用適當?shù)娜軇┻x擇性地洗脫。廣州碩譜生物科技有限公司氧化鋁SPE柱價格固相萃取，是從萃取原理發(fā)展起來的，色譜和萃取一樣使用分配比的概念，所以很難理解。

硅填料的粘接和封尾意味著什么？

硅膠填充物是不衍生的硅膠，通常作為所有硅膠結(jié)合相的基體。

在純硅膠 Si表面的親水硅醇基通過硅1烷化反應，形成疏水性烷1基或芳香基基團，從而改變填料的極性。例如，C18填料是將十八烷1基的長鏈與硅膠表面連接。

硅膠鍵合相中存在一定數(shù)量的未反應硅醇基，從而導致次生相互作用。這種次生相互作用對于提取或保留強極性物或污染物十分有用，但對分析物的吸附也可能是不可逆轉(zhuǎn)的。采用陽離子交換機制，可將萃取過程中pH調(diào)至低于目標物pKa的兩個pH單位，即pH=2。為減小未反應硅醇基的影響，通常是在鍵合反應之后，用封端劑鈍化填料，這個過程稱為封尾。

溶劑環(huán)境的pH怎么影響化合物在小柱上的保留，為什么我們要關注化合物的pKa值，在C18小柱中需要考慮這些因素嗎？

我們來說一下，Ka指的是酸度系數(shù)，又名酸離解常數(shù)，可以理解為酸離解H離子的能力，而pKa=-lgKa，對于酸，在環(huán)境pH下存在如下平衡：左邊的A-/HA，實際是指溶劑環(huán)境下，離子態(tài)和分子態(tài)的比例，右邊反映了左側(cè)兩者的轉(zhuǎn)化關系，取決于（pH-pKa)的數(shù)值大小。對于離子交換小柱，保持目標物的離子化而非分子態(tài)，是一個關鍵點，這對于離子交換作用機理的交換柱，將直接關系到其實驗成敗。16），在一定的pH條件下還可以呈陽離子狀態(tài)，同時該化合物具有疏水的非極性官能團及親水的極性官能團。而對于硅膠鍵合C18小柱的萃取，由于硅膠（—SiOH）不能完全“封端”，在pH大于4.0的情況下，硅膠都會帶上負電荷，因而會使得能電離的化合物與硅膠作用，增強了這種附帶的次級作用理（主作用力為非極性相互作用力），而使得此類物質(zhì)在硅膠-C18上的保留增強，若只考慮C18的非極性作用力，必然會導致回收結(jié)果的不盡人意。

固相萃?。⊿olid Phase Extraction，簡稱SPE）,也稱固相提取，是一項結(jié)合了選擇性保留、選擇性洗脫等過程的分離技術(shù)。 SPE也是一個柱色譜分離過程，分離機理、固定相和溶劑的選擇等方面與高1效液相色譜（HPLC）有許多相似之處。廣州碩譜生物科技有限公司氧化鋁SPE柱價格淋洗液和洗脫液的優(yōu)化對于反相模式和正相模式，應在不影響回收率的前提下，增大淋洗液洗脫的強度并降低洗脫液的洗脫強度。

SPE小柱保留雜質(zhì)固相萃取操作一般有三步：

1）、活化--除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境（注意整個過程不要使小柱干涸）。

2）、上樣--將樣品轉(zhuǎn)移入柱，此時大部分目標化合物會隨樣品基液流出，雜質(zhì)被保留在柱上，故此步驟要開始收集（注意流速不要過快）。

洗脫---用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集，合并收集液（注意流速不要過快）.

淋洗通常需要干燥，原因是什么？

回答：淋洗液一般都要干燥，主要考慮以下因素：

1.通常因為反相萃取用于化合物的預處理，正如反相萃取在色譜中是一種常見的分離方法，反相萃取中的淋洗液通常是一種水相或含水的緩沖溶液，除去水分，從而便于后續(xù)的干燥、濃縮步驟。

2.有些項目，在淋洗步驟完成后，直接用一定量的洗脫液，如1 ml甲1醇洗脫，這個過程將洗脫和定容集進行一步處理，前者的處理必然會對洗脫步驟的定量結(jié)果產(chǎn)

三、就是溶劑互溶問題，當淋洗過程中使用的溶劑的極性與洗脫溶劑的極性相差很大時，就會產(chǎn)生1乳化分層，洗脫阻力大，洗脫液有被稀釋的危險等，從而導致洗脫效果不同，從而導致試驗結(jié)果的失敗。

正相作用機理

正相模式是指SPE小柱固定相極性大于流動相極性的分離模式。主要是利用：

固相萃取材料極性表面與目標物極性官能團之間的極性相互作用。極性作用力的強度比非極性作用力要大，但比離子作用力小。常見的極性官能團包括羥基、胺基、巰基等。弱極性的基質(zhì)環(huán)境有利于極性作用力的形成，因為弱極性溶劑沒有能夠與極性固定相形成氫鍵的官能團。2、上樣——將樣品（包括分離物和干擾物）用一定的溶劑溶解，轉(zhuǎn)移入柱并使組分通過吸附劑，吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物。因此，在SPE的正相萃取中，樣品基質(zhì)多為弱極性的，如正己烷、二氯甲i烷、菜油等，而目標物大多含有極性官能團。

空氣進入填料。這個原因比較常見但也是比較難發(fā)現(xiàn)的原因， SPE 小柱是由篩板，填料，柱管組成，不是有機的整體，所以在運輸尤其是長途運輸?shù)倪^程中，就會出現(xiàn)微小的松動，導致空氣進入填料，一般不容易被肉眼所發(fā)現(xiàn)。含有空氣的填料在氣壓的作用下導致活化溶劑流下速度很慢。反相非極性的SPE柱通常更適合從極性基質(zhì)中提取分離出非極性和中等極性的目標化合物。說到這大家可能就容易理解為什么同一批次的小柱，會出現(xiàn)輕微的流速參差不齊的情況，可以用 SPE 裝置加正壓的方式抽掉空氣后，再一起加溶劑。