武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;方法首先采用Western印跡方法檢測過表達(dá)MAGI3后E-cadherin蛋白表達(dá)條帶的遷移變化,。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。
GaMYB2 在洋蔥表皮細(xì)胞中的瞬時表達(dá)分析:采用基因槍轟擊的方法,用包裹質(zhì)粒的金粉對洋蔥表皮進(jìn)行轟擊,暗培養(yǎng)過夜后,在激光共聚焦顯微鏡下進(jìn)行觀察,從圖A 中可以看出對照GFP空載體在整個洋蔥細(xì)胞均能看到綠色熒光,為組成型表達(dá);從圖B 中發(fā)現(xiàn)GaMYB2-GFP 的融合表達(dá)載體只能在細(xì)胞核中能看到綠色熒光,這進(jìn)一步證明該蛋白不具有跨膜蛋白結(jié)構(gòu),定位在細(xì)胞核中,具有轉(zhuǎn)錄因子的一般特征。通過比較不同侵染液濃度、侵染時間、取材部位、預(yù)處理等條件下的轉(zhuǎn)化效果,優(yōu)化了農(nóng)介導(dǎo)的洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化系統(tǒng),并且成功檢測到大蕉ASR蛋白(MpASR)與GFP的融合蛋白在洋蔥表皮細(xì)胞中的分布。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;為了克服植物修復(fù)技術(shù)中超富集植物生長緩慢和可收獲的生物量小等的限制,將外源基因在植物。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。
磷(Phosphorus, P)是植物生長發(fā)育必需的大量營養(yǎng)元素之一,廣泛地參與到植物體內(nèi)的能量轉(zhuǎn)移、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、光合作用等過程。它還是許多生物大分子如核酸、磷脂和含磷蛋白酶類的重要組成部分。Bra1編碼蛋白的氨基酸序列中包含有BAHD?;D(zhuǎn)移酶家族特有的HXXXD功能區(qū)以及DFGWG保守結(jié)構(gòu)域,說明Bra1基因是BAHD酰基轉(zhuǎn)移酶基因家族的一個成員。然而,由于P在土壤中容易被固定和沉淀,且植物從土壤中吸收的主要是無機(jī)態(tài)正磷酸鹽(Phosphate, Pi),故相對于其他營養(yǎng)元素,P在土壤中的移動性和有效性均很低,其也因此常常成為農(nóng)田及自然生態(tài)系統(tǒng)中植物生長的主要限制因子之一。植物在漫長的進(jìn)化過程中發(fā)展出了一套適應(yīng)缺磷環(huán)境的形態(tài)變化及生理生化方面的機(jī)制,包括根系構(gòu)型的改變、酸性磷酸酶、RNA酶及有機(jī)酸的分泌、與叢枝菌根真菌(AMF, Arbuscular Mycorrhizal Fungi)形成共生體系等等。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;發(fā)現(xiàn)CsWRKY22與可可WRKY29,CsWRKY50與棗WRKY50,CsWRKY72與可可WRKY72,CsPR1-1與可可PR-1,CsPR1-2與龍眼PR-1的親緣關(guān)系較近。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。
洋蔥(Allium cepa L.)屬百合科蔥屬,是世界主栽蔬菜之一,也是我國主要的出口蔬菜之一。FT(FLOWERING LOCUS T)基因是開花植物光周期反應(yīng)過程中調(diào)控植物成花的關(guān)鍵基因,也是重要的開花整合因子。實驗室在前期工作中已經(jīng)成功了洋蔥的開花素類似基因Ac FT1及Ac LFT,為確定其功能,本試驗分別構(gòu)建了Ac FT1及Ac LFT的正義、反義和RNAi干擾的植物表達(dá)載體,通過凍融法導(dǎo)入到根癌農(nóng)EHA105中,進(jìn)而通過花序侵染法轉(zhuǎn)入模式植物擬南芥中。植物脂肪酸除了在食品工業(yè)中具有重要價值以外,還在植物抗寒、抗害方面具有重要生。通過熒光定量PCR法測定Ac FT1及Ac LFT在擬南芥抽薹前葉片中的相對表達(dá)含量,觀察轉(zhuǎn)化植株的形態(tài)學(xué)指標(biāo),繼而確定Ac FT1及Ac LFT在洋蔥成花中的作用,為實現(xiàn)洋蔥抽薹開花的基因調(diào)控提供參考。試驗結(jié)果歸納如下:⑴構(gòu)建了Ac FT1的正義植物表達(dá)載體p Z-Ac FT1,反義植物表達(dá)載體p R-AcFT1,RNAi植物表達(dá)載體p RNAi-Ac FT1;構(gòu)建了AcLFT的正義植物表達(dá)載體p Z-AcLFT,反義植物表達(dá)載體p R-Ac LFT,RNAi植物表達(dá)載體p RNAi-Ac LFT.;⑵利用凍融法將重組質(zhì)粒p Z-Ac FT1、p R-Ac FT1、p RNAi-Ac FT1、p Z-Ac LFT、p R-Ac LFT、p RNAi-Ac LFT導(dǎo)入根癌農(nóng)EHA105中,利用花序侵染法對擬南芥進(jìn)行轉(zhuǎn)化。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司;植物修復(fù)(phytoremediation)是近來發(fā)展起來的一種利用合適的超富集植物徹底清除重金屬污染的綠色技術(shù)。公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細(xì)胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達(dá)平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺;可以開展各類動、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實驗。
選取含有氯嘧磺隆抗性標(biāo)記的ILV1基因和報告基因GFP二元載體的農(nóng)AGL-1,采用單因子和雙因子方法研究根癌農(nóng)AGL-1介導(dǎo)柱花草菌CH008轉(zhuǎn)化過程中各主要因素對轉(zhuǎn)化率的影響,優(yōu)化構(gòu)建ATMT轉(zhuǎn)化柱花草膠孢菌體系條件,使轉(zhuǎn)化效率達(dá)到300~400個轉(zhuǎn)化子/106個孢子,即根癌農(nóng)AGL-1濃度OD600=0.8,菌分生孢子濃度為1×106個/mL,AS濃度為100 μmol/L,誘導(dǎo)時間為6 h,共培養(yǎng)溫度和時間分別為25 ℃和4 d。經(jīng)PCR檢測都有GFP片段,并能夠表達(dá)綠色熒光蛋白。利用ROS熒光指示劑DCFH-DA,Ca2 熒光指示劑Fluo-3AM和NO熒光指示劑DAF-FMDA檢測胞內(nèi)ROS、Ca2 和NO水平,發(fā)現(xiàn)亞可誘導(dǎo)酵母胞內(nèi)ROS,Ca2 和NO水平顯著升高。這為進(jìn)一步開展菌對柱花草的致病機(jī)理研究提供了依據(jù),優(yōu)化轉(zhuǎn)化體系有利于后續(xù)突變體庫的擴(kuò)大、篩選突變體和致病功能基因的研究。