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4.樣品預(yù)處理在樣品基體比較復(fù)雜的情況下，樣品的純化過濾更為重要，樣品處理不好，容易堵塞樣品口和色譜柱。試樣要經(jīng)過過濾。5.其他堵塞現(xiàn)象●液相系統(tǒng)中常堵的位置有溶劑吸濾頭，它在管道內(nèi)會堵塞許多氣泡，根據(jù)吸濾頭材質(zhì)選擇合適的清洗方式，必要時更換新的?！駟蜗蜷y芯此處堵住，將導(dǎo)致泵內(nèi)壓力不穩(wěn)，有氣泡，嚴(yán)重時泵出液體，清洗不能排除故障時，更換配件。●自動進(jìn)樣器針座，此處堵了會造成進(jìn)樣口漏液，反沖無法解決故障時，更換針座密封，若進(jìn)樣隔墊堵塞進(jìn)樣針可用打火機(jī)加熱灼燒，試樣無法解決故障時，更換針座密封。色譜柱壓力升高，反沖不能解決，應(yīng)更換新柱子。循環(huán)池體積較小，如堵塞后無法沖出，可更換新配件。樣品瓶和蓋墊選擇不當(dāng)，可能對實驗結(jié)果造成影響，更嚴(yán)重的會對儀器造成損壞，如下圖中由于進(jìn)樣瓶蓋選擇不當(dāng)，導(dǎo)致進(jìn)樣針扎彎。

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樣品分析時，是否遇到過不均勻性差、數(shù)據(jù)分析有雜峰？碰到這樣的情況，很多小伙伴首先就會分析實驗的過程、實驗方法是否正確，但其實步應(yīng)該先看看進(jìn)樣瓶瓶蓋是否擰正。由于錯誤的擰蓋或壓蓋(針對鉗口瓶)也會對色譜分析產(chǎn)生干擾。見到這兒，相信大家都是一臉的問號。別不信，因為試驗測試結(jié)果顯示，進(jìn)樣瓶蓋擰得太緊，增加了產(chǎn)生雜峰的風(fēng)險(下面是測試譜圖)。接下來就讓我們一起來看一下擰蓋/壓蓋不正確所存在的危險，以及如何判斷蓋是否正確上緊/壓緊的狀態(tài)！(僅以2 mL樣品瓶、 PP蓋子和 PTFE/硅膠墊片為例，對鉗口瓶蓋墊也同樣適用。)

常規(guī)除氣方法1.吹氦脫氣。使用氦氣在液體中溶解度低于空氣這一特性，在0.1 MPa壓力下，大約60 mL/min的流速通入流動相儲液容器10~15 min，就能有效地將溶解的空氣從流動相中排除，可有效排除80%的氧氣。利用一種的分布式噴射裝置，一體積中的氦氣可以從流動相中幾乎全部體積中排除。這就是說，1 L氦氣可以通過1 L流動相進(jìn)行排氣。這樣的脫氣方法是好的，但是我國氦氣價格比較高，很少有實驗室采用這種方法。

2.加熱回流法。該方法的脫氣效果較好。運(yùn)行時要注意冷凝塔的冷卻效率，否則溶劑流失，混流相比例將發(fā)生變化。3.抽真空除氣。這種方法可以用真空泵，將溶解氣體降到0.05~0.07 MPa。但真空脫氣將改變混合溶劑的組成，從而影響實驗的重復(fù)性，故多用于單溶劑體系的分析。4.超聲波除氣。超聲波清洗機(jī)內(nèi)用超聲波對欲脫氣進(jìn)行振蕩10~20分鐘。該方法的脫氣效果差。5.聯(lián)機(jī)通風(fēng)?，F(xiàn)商品 HPLC儀表，可與線式脫氣機(jī)配套。聯(lián)機(jī)除氣簡單，故障少，效果好。推薦購買儀器時一定要購買，有些公司為選購件，所以與儀器公司談配置時要和公司確認(rèn)。

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根據(jù)分離機(jī)制的不同，液相色譜可以分為：水相固吸附色譜水液分布色譜法水離子交換色譜——離子對色譜分子量排阻色譜(或凝膠滲透色譜)I)固吸附色譜流體為液體，固定相為固體吸附劑，物質(zhì)按吸附量的不同而進(jìn)行分離。㈡液-液分配色譜法移動相和固定相都是液體的色譜法，即液-液色譜，是利用樣品組分在兩種不相溶的液相之間的分布進(jìn)行分離。一個液相是一個流動相，另一個是在載體上施加固定相。流相極性小于固定相極性的液-液色譜方法稱為正相分配色譜。流相極性大于固定相極性的液-液色譜稱為反相分配色譜。㈢離子交換色譜法㈣離子對色譜法。

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分子排阻色譜法移動相就像人體的血液一樣，其質(zhì)量直接影響著整個系統(tǒng)的正常運(yùn)行。應(yīng)采用 HPLC級溶劑，溶劑之間不可混溶，不可直接更換！異作為過渡溶劑，通常在換溶劑時，水相和與其不溶于水。留意溶劑的截止波長。截斷波長是指這種溶劑在紫外檢測器中使用的低波長，在低于此波長時，溶劑會有強(qiáng)烈的紫外吸收，從而影響極限的穩(wěn)定性，干擾對被分析物質(zhì)的檢測。HPLC所用的水必須是新鮮的，并經(jīng)過0.45微米的濾膜過濾。推薦每天換新鮮水。長時間不使用時，要用替換使用水管道，防止霉變。保持色譜柱和系統(tǒng)，使用完儀器后，應(yīng)采用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑吹确椒āＨ粢镁彌_鹽，首先要把鹽洗干凈。如果儀器長時間不使用，建議封存純。由于傾向于生成聚合物。推薦封存、/水或/水。如果發(fā)生流路堵塞，可試著反接后進(jìn)行沖洗。藻類在被污染的溶劑或溶劑瓶中生長，會縮短溶劑過濾器的壽命，并影響泵及系統(tǒng)的性能。水溶劑或磷酸鹽緩沖液(pH 4-7)尤其如此。

泵使用要點把裝有溶劑瓶的溶劑箱放在泵上或更高的地方。對于四元泵，當(dāng)使用鹽溶液或時，建議將鹽溶液與下方梯度閥口連接，使與上面梯度閥口連接，通道好在水或鹽溶液通道的正上方。推薦用水定期沖洗MCGV通道，去除可能在閥口析出的鹽結(jié)晶。開泵前，用至少兩個容積(標(biāo)準(zhǔn)脫氣機(jī)30 mL，微脫氣機(jī)10 mL)沖洗真空脫氣機(jī)，尤其是關(guān)閉一段時間后(如過夜)，以及通道中使用揮發(fā)性混合溶劑，防止溶劑瓶內(nèi)的玻璃濾頭(過濾器)堵塞和長菌，濾頭表面有黑色或黃色污染說明發(fā)生堵塞，應(yīng)立即清洗或更換。

經(jīng)常檢查排液閥的白頭過濾。檢驗方法：旋開排液閥，用水作流動相。對標(biāo)準(zhǔn)脫氣機(jī)(G1322A)，流量5 ml/min的流量，如果壓力超過10 bar，建議更換。對微型脫氣機(jī)(G1379A)，流量2 ml/min的流量，如果壓力超過5 bar，建議更換。使用低流速時，應(yīng)檢查所有1/16英寸接頭是否有泄漏(用壓力試驗或液體泄漏試驗)。無論何時更換泵密封墊，排液閥的慮芯也應(yīng)更換。對活塞密封墊進(jìn)行更換時，應(yīng)檢查活塞桿是否有劃痕。擦傷的活塞會造成輕微的泄漏，降低密封墊的使用壽命。擦傷的活塞應(yīng)盡早更換。在使用緩沖溶液時，在關(guān)閉泵之前先用水沖洗系統(tǒng)。如果要長時間使用0.1摩爾或更高濃度的緩沖液，好選擇密封墊清洗附件，以減少密封墊和活塞桿的磨損。若使用高濃度緩沖鹽，可考慮采用熱水(50-60℃)沖洗鹽通道，以確保系統(tǒng)中不存在緩沖鹽殘留。