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發(fā)布時間:2021-01-09 17:33  






ELISA試劑盒的成分

1 預包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T

2 酶標記抗體: (30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1

3 標準品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2

4 緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

5 標記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1

7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1

8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) (450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標準品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑)



ELISA試劑盒的發(fā)展前景

臨床測定技術的發(fā)展主要在于方法學的發(fā)展,而方法學的發(fā)展依托于試劑生產(chǎn)技術不斷進步更新和型標記物的應用。分子生物學正在并肯定會讓對整個生命科學有一個徹底的認識,其對測定技術發(fā)展的影響也是直接而又有效的,對以前一些難以檢測的生物活性物質(zhì)的測定,并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。

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ELISA試劑盒的試驗原理

試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關系。

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ELISA試劑盒的分類

檢測范圍和靈敏度不同,用量少時,可使用分裝,前期是它的長久性不是很好。
試劑盒的標準曲線高點OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。
試劑盒的標準曲線相關系數(shù)R≥0.98。
試劑盒重復性好,板內(nèi)、板間變異系數(shù)均<9 %。
試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。

檢測抗體及酶結(jié)合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作,保證實驗結(jié)果的重復性。




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