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以下列出了一些色譜柱的清洗溶劑和順序，作為參考：以正已烷(或庚烷)、和的硅膠柱依次沖洗，然后按相反的順序沖洗，所有的溶劑必須嚴格脫水?？梢郧逑吹魵埩舻膹姌O性雜質(zhì)，并對硅膠表面進行活化。反相柱用水、、、(或)依次沖洗，然后按反序沖洗。若下一步分析所用的流動相不含緩沖液，就可以忽略一步用水沖洗?？上慈埩舻姆菢O性雜質(zhì)，多次在()沖洗時多次注射100-200μ l四氫，有助于去除強疏水性的雜質(zhì)。四氫與或混合溶液可去除類脂。有時候還要注射幾次二甲砜。用0.1%的、、三梯度洗脫可去除蛋白質(zhì)污染。用稀酸緩沖洗陽離子交換柱，用稀堿緩沖液沖洗，把交換性能很強的鹽去掉，再用水、、(除去固定相表面吸附的有機物)、、水，依次沖洗。

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保存色譜柱時，柱中應(yīng)充滿或，柱連接處應(yīng)緊固，防止溶劑揮發(fā)干燥。請勿將緩沖液留在柱內(nèi)待一夜或更久。8、在使用色譜柱時，如果壓力升高，有一種可能是燒結(jié)過的濾片被堵塞，此時應(yīng)更換濾片或取出清洗；還有一種可能是大分子進入柱內(nèi)，使柱頭受到污染；如果柱效降低或色譜峰變形，可能會出現(xiàn)柱頭塌陷，體積增大。當(dāng)出現(xiàn)后兩種情況時，小心將柱頭接頭擰開，用潔凈的小鋼將柱頭填料取出1~2 mm的高度(注意將污染的填料取凈)再將柱內(nèi)填料整平。接著將其填充到色譜柱中，用合適的溶劑潤濕固定相(與柱相同)，壓平，然后擰緊柱接頭。這種處理后柱的效能有所提高，但難以恢復(fù)到新柱水平。柱失效一般為柱端，在分析柱前安裝與分析柱相同固定相的短柱(5-30毫米)，可起到保護、延長柱壽命的作用。使用保護柱會失去一些柱效，這是值得的。

柱溫箱，在柱溫箱中有色譜柱，實際上分離是發(fā)生在色譜柱上，柱溫箱本身的保養(yǎng)和使用要點并不多說。小探認為，實際上柱溫箱是整個液相色譜系統(tǒng)中皮實的一個部件，只要保證接頭擰緊不漏氣，好像一萬年都看不出來它出了什么問題，要注意的是安捷倫的柱溫箱會有兩個控制溫區(qū)，左邊寫著3 uL，右邊寫著6 uL，一般情況下，我們要用3 uL的柱溫箱，一般情況下，我們要使用3 uL的那個，以減小儀器的延遲和擴散。

探測器。探測器的種類很多，而且各有千秋，在此我們還是要找大家的紫外光(VWD)/二極管陣列(DAD)探測器。兩者均為紫外類檢測器，盡管光路設(shè)計不同，但基本原理是一致的。6.1探測系統(tǒng)中一個非常重要的部分是光源，俗稱燈，它是一種消耗品，就像家里的燈泡，用到一定程度就壞了。但家中的燈泡不能像家里的燈泡那樣點不亮?xí)r要更換，因為放在檢測器中的燈是需要發(fā)射能量的，一旦能量衰減到一定程度，就會出現(xiàn)基線噪聲變大、靈敏度降低等一系列問題。一般情況下，燈泡的壽命是2000 h，當(dāng)達到這一時，我們就特別注意燈泡的能量狀況，可以在儀器維護軟件中自帶的“燈能量測試”來判斷，測試結(jié)果將分別對低、高三個波長段的能量進行評估，一旦某一波長段的結(jié)果顯示失敗，就表示要換燈，通常個失敗的是低波長段。檢測器中的另一個重要部分是檢測器，也被稱為流通池。許多時候，大家關(guān)心的是檢測池是否被堵住，因為檢測池一般不耐壓，所以一旦堵住，很容易造成損壞。

先要認識到，一般國產(chǎn)其實不需要額外的過濾處理，直接使用是沒有問題的。甚至某些固體顆粒雜質(zhì)，都可以從液相流路系統(tǒng)前端的過濾頭中排除。真正容易出現(xiàn)問題的是水中的細菌。新制純水在室內(nèi)放置數(shù)天后會產(chǎn)生細菌，而這些細菌雖然肉眼看不到，卻足以堵塞柱狀填料顆粒的空隙，導(dǎo)致柱子迅速報廢。

色譜儀是一種易學(xué)難用的儀器，尤其注重儀器的正確使用。流體工作者接觸到流動相，流動相是引起液相色譜各種問題的主要來源。液相色譜儀常見的故障有堵塞和漏漏。以下對這兩點分別展開討論。(注：流動相以為例，色譜柱以C18為例)“堵”的現(xiàn)象是柱壓異常升高，直接原因是流路不暢。造成“堵塞”的原因：流動相中的細菌污染。阻塞主要發(fā)生在色譜柱前端，流動相中存在雜質(zhì)，細菌是雜質(zhì)的主要來源。長時間，濾頭粘附細菌，造成泵液不能正常工作這一問題的解決辦法就是保證水的可靠性。以下是兩種建議方法：(1)好購買實驗室純水機，既方便又可靠，質(zhì)量也放心。的缺點是價格昂貴。(2)成箱購買市售品牌純凈水，如怡寶或娃哈哈500 ml，這些水的質(zhì)量足以滿足液相色譜的要求。有一個細節(jié)值得注意：在絕大多數(shù)書籍中，凡談到配制流動相到都要進行過濾的步驟。

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固體萃取柱的應(yīng)用：

單純固相萃取可以手工完成，即在固相萃取柱的上端連接一個注i射器，萃取柱通過擠壓將萃取柱中的液體排出。此外，也可采用正壓力或負壓力的固相萃取設(shè)備對批量樣品進行固相萃取。伴隨著技術(shù)的發(fā)展，樣品量的不斷增加，越來越多的分析實驗室開始采用自動固相萃取儀，尤其是多通道固相萃取儀。

固相萃取儀是利用固體吸附劑將液體樣品中的目標化合物吸附到樣品基體和干擾物，然后再用洗脫液洗脫或加熱解吸附達到分離目標化合物的目的(即樣品的分離、純化和濃縮)，旨在減少樣品基質(zhì)的干擾，提高檢測靈敏度，其應(yīng)用于各種食品安全檢測、農(nóng)產(chǎn)品殘留監(jiān)測、醫(yī)i藥衛(wèi)生、環(huán)境保護、商品檢驗、自來水及化工實驗室。

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