目前，傳統(tǒng)的獲得多基因轉(zhuǎn)基因植株的方法包括共轉(zhuǎn)化，再轉(zhuǎn)化W及雜交。但是運(yùn) 些傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)是共轉(zhuǎn)化的兩個(gè)或多個(gè)基因的轉(zhuǎn)化效率是不可控的，每個(gè)基因在目標(biāo)基因組的插入位置也是不一樣的，而基因分離會(huì)導(dǎo)致不穩(wěn)定的遺傳后代。另外再轉(zhuǎn)化W及雜 交都是耗時(shí)的過程。

而為了克服運(yùn)些缺點(diǎn)，具有單個(gè)或者多個(gè)轉(zhuǎn)錄盒子的多基因載體應(yīng)運(yùn)而生并成功 應(yīng)用于多個(gè)研究，但是運(yùn)些多基因表達(dá)載體的應(yīng)用沒有得到廣泛的推廣應(yīng)用。因?yàn)榇蟛糠?的方法需要亞克1隆W至于克1隆所耗時(shí)間拉長;沒有標(biāo)簽或者報(bào)告基因與目標(biāo)基因相連，運(yùn) 樣就導(dǎo)致蛋白或者基因的鑒定比較困難；另外，某些方法如采用同尾酶構(gòu)建多基因載體的方法受限于可用的酶的數(shù)量不多運(yùn)個(gè)問題。所W構(gòu)建多基因載體需要根據(jù)研究目的而設(shè)計(jì)。

胰蛋白酶系自牛、羊或豬胰中提取的一種蛋白水解酶。中國藥品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定按干燥品計(jì)算，每1mg 的效價(jià)不得少于2500單位。 由牛、羊、豬胰臟提取而得的一種肽鏈內(nèi)切酶，只斷裂賴氨酸或精氨酸的羧基參與形成的肽鍵。白色或米黃色結(jié)晶性粉末。溶于水，不溶于乙醇、甘油、氯1仿和乙1醚。分子量24 000，pI 10.5，zui適pH值7.8～8.5左右。pH值2～3是穩(wěn)定的。pH值5以上易自溶失活。pH>9.0不可逆失活。Ca2 對(duì)酶活性有穩(wěn)定作用；重金屬離子、有機(jī)磷化合物、DFP、天然胰蛋白酶抑制1劑對(duì)其活性有強(qiáng)烈抑制。臨床用于消1炎，工業(yè)上用于皮革制造、生絲處理、食品加工等。

蛋白質(zhì)含量測定方法之雙縮脲法（biuret法）

實(shí)驗(yàn)原理雙縮脲（NH3CONHCONH3）是兩個(gè)分子脲經(jīng)180℃左右加熱，放出一個(gè)分子氨后得到的產(chǎn)物。在強(qiáng)堿性溶液中，雙縮脲與CuSO4形成紫色絡(luò)合物，稱為雙縮脲反應(yīng)。凡具有兩個(gè)酰胺基或兩個(gè)直接連接的肽鍵，或能過一個(gè)中間碳原子相連的肽鍵，這類化合物都有雙縮脲反應(yīng)。

紫色絡(luò)合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比，而與蛋白質(zhì)分子量及氨基酸成分無關(guān)，故可用來測定蛋白質(zhì)含量。測定范圍為1-10mg蛋白質(zhì)。干擾這一測定的物質(zhì)主要有：硫酸銨、tris緩沖液和某些氨基酸等。

此法的優(yōu)點(diǎn)是較快速，不同的蛋白質(zhì)產(chǎn)生顏色的深淺相近，以及干擾物質(zhì)少。主要的缺點(diǎn)是靈敏度差。因此雙縮脲法常用于需要快速，但并不需要十分準(zhǔn)確的蛋白質(zhì)測定。