低溫生物菌種的篩選分離

篩選

工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩，挑選具有某種能力的有用菌種。

分離

首先是從土壤或腐生植物中收集含菌樣品，用無菌水稀釋后，涂布于置有適宜細(xì)菌或霉菌生長的瓊脂培養(yǎng)基平皿上，并將其倒置于恒溫箱中，培養(yǎng)一定時(shí)間，平皿上長出的許多單個(gè)菌落（單一微生物的集落）經(jīng)分別分離后即為各種純種菌株，簡稱純種，移種至試管斜面培養(yǎng)基上，置4℃冰箱備用。

低溫生物菌種——篩選模型

根據(jù)不同的篩選目的，采用不同的篩選模型。如常規(guī)篩選產(chǎn)生菌的方法是將土壤中分離所得的純種，在含有瓊脂培養(yǎng)基的平皿上培養(yǎng)后，用打孔器將菌塊移至含有試驗(yàn)菌的瓊脂培養(yǎng)基上，在適宜的溫度下培養(yǎng)一定時(shí)間后取出，如在菌塊的周圍有透明的抑菌圈，則表明此菌種具有產(chǎn)生抑制試驗(yàn)菌生長的抑菌物質(zhì)的能力。所得菌種經(jīng)過搖瓶液體發(fā)酵，選出生產(chǎn)能力高的菌種。另一方面對所提取的進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析、藥理試驗(yàn)及臨床試驗(yàn)等，確為有效者，即可作為生產(chǎn)菌種。又如篩選脂肪酶生產(chǎn)菌種的方法是將分離所得的霉菌涂布于含有牛脂的瓊脂培養(yǎng)基上，恒溫培養(yǎng)一定時(shí)間，如菌落周圍出現(xiàn)透明圈的，則該菌具有分解脂肪的能力，進(jìn)一步作搖瓶發(fā)酵測定酶活力，挑選產(chǎn)量高者作生產(chǎn)菌種的出發(fā)菌株。

生物有機(jī)肥產(chǎn)品生產(chǎn)使用現(xiàn)狀

細(xì)菌類生產(chǎn)用除常見的芽孢外， 還出現(xiàn)了高地芽孢菌、 類干酪乳菌、 屎腸球菌、 鹽居固氮菌等新， 其中， 高地芽孢菌和鹽居固氮菌普遍存在于土壤環(huán)境中， 未見致病性報(bào)道， 屬風(fēng)險(xiǎn)一級(jí)； 類干酪乳菌又名為副干酪乳菌， 雖為風(fēng)險(xiǎn)一級(jí) ， 但有從動(dòng)物受傷部位分離到該菌的報(bào)道；屎腸球菌屬于乳酸菌類，屬風(fēng)險(xiǎn)二級(jí)， 建議謹(jǐn)慎使用。伯克霍爾德氏菌是一些具有生物防治、 促進(jìn)植物生長和生物修復(fù)等功能的細(xì)菌， 但同時(shí)也是可以引起鼻疽、 類鼻疽病的致病菌， 因此真菌伯克霍爾德氏菌屬于風(fēng)險(xiǎn)三級(jí)， 需做致病性試驗(yàn)， 建議慎用或不用。真菌類生產(chǎn)用菌株主要為絲狀真菌和酵母菌。哈茨木霉、 米曲霉、 淡紫紫孢菌、 長枝木霉、 綠色木霉、 棘孢木霉、 黑曲霉、 粉紅螺旋聚孢霉、 金龜子綠僵菌等屬于生物安全風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)二級(jí)， 需按照NY/T 1109－2017 《微生物肥料生物安全通用技術(shù)準(zhǔn)則》 進(jìn)行毒理學(xué)測試。酵母菌主要以釀酒酵母為主， 還有少量東方伊薩酵母、杰丁塞伯林德納氏酵母 （原產(chǎn)朊假絲酵母、 杰丁畢赤酵母）、 膜醭畢赤酵母、 解脂耶羅威亞酵母等， 屬于生物安全風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)一級(jí)， 可免做毒理學(xué)試驗(yàn)。

什么是低溫生物菌種？

低溫生物菌種又稱生物肥料、接種劑或菌肥(bacterial manure)等，是指以微生物的生命活動(dòng)為核心，使農(nóng)作物獲得特定的肥料效應(yīng)的一類肥料制品。微生物肥料和微肥有本質(zhì)的區(qū)別：前者是活的生命，而后者是礦質(zhì)元素。微生物資源豐富，種類和功能繁多，可以開發(fā)成不同功能、不同用途的肥料。而且微生物菌株可以經(jīng)過人工選育并不斷純化、復(fù)壯以提高其活力，特別是隨著生物技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展，通過基因工程方法獲得所需的菌株已成為可能。巨大芽孢菌、膠質(zhì)芽孢菌、固氮芽孢菌、球形芽孢菌、側(cè)孢短芽孢菌等被廣泛用于生產(chǎn)生物肥料。