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等溫核酸試劑盒
重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)(RPA)是2006年由英國科學(xué)家研發(fā)的一種核酸恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。它是利用多種酶參與,在體外模擬生物體內(nèi)DNA復(fù)印,恒溫條件下短時(shí)間內(nèi)實(shí)現(xiàn)靶基因大量擴(kuò)增,既可以擴(kuò)增DNA,也可以擴(kuò)增RNA。RPA技術(shù)具有恒溫、快速、便攜、靈敏度高、特異性強(qiáng)和操作簡單等優(yōu)點(diǎn),是目前很有望替代PCR技術(shù)的核酸等溫?cái)U(kuò)增方法,在基層現(xiàn)場診斷中,具有廣闊的應(yīng)用前景。
相對來說RPA是很好的恒溫?cái)U(kuò)增法,可在較低溫下恒溫?cái)U(kuò)增,不需要復(fù)雜儀器設(shè)備,操作簡單、反應(yīng)時(shí)間短,特異性好、靈敏度高,可采用電泳、熒光、側(cè)向流試紙等多種方式檢測擴(kuò)增產(chǎn)物
核酸試劑盒
英國TwistDx 公司(前身為ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英國劍橋Babraham研究院建立的生物技術(shù)公司。該公司通過突破等溫DNA擴(kuò)增,開發(fā)的重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)(RPA),被譽(yù)為DNA診斷領(lǐng)域的革命性創(chuàng)新。
RPA技術(shù)主要依賴于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈 DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,反應(yīng)溫度在37°C左右。
側(cè)向流檢測試紙條作為一種能夠快速、方便、簡單、無需人員和大型儀器設(shè)備操作的 一種檢測核酸的POCT方法,已經(jīng)在臨床診斷,環(huán)境監(jiān)測和食品安全等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用研究。
為便于現(xiàn)場可視化檢測,本產(chǎn)品采用了FAM(FITC) -生物素報(bào)告基因進(jìn)行層析檢測。陰性樣品中,金??股锼嘏c高濃度FAM(FITC) -生物素報(bào)告基因充分結(jié)合,結(jié)合物在對照Control條帶被抗FAM (FITC)攔截。對于陽性樣本,F(xiàn)AM(FITC) -生物素報(bào)告基因被裂解,金??股锼氐呐悸?lián)物生物素在檢測條帶積累,而在對照條帶積累減少。
基本檢測原理是首先將待檢產(chǎn)物和兩種檢測物混合,特異性結(jié)合后形成帶有兩種標(biāo)記(生物素和FITC)的復(fù)合物;隨后將該復(fù)合物滴加到試紙條的加樣區(qū),與加樣區(qū)的膠體金顆粒結(jié)合,新形成的復(fù)合物在層析膜擴(kuò)散作用下擴(kuò)散至檢測線,只有標(biāo)記有生物素的復(fù)合物會被生物素配體捕獲,從而使檢測線“顯色”,而未結(jié)合檢測物的膠體金顆粒會繼續(xù)擴(kuò)散至質(zhì)控線并捕獲進(jìn)而使質(zhì)控線“顯色”。