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等溫核酸試劑盒
據(jù)介紹,RPA檢測(cè)的靈敏度很高,能夠?qū)⒑哿康暮怂?尤其是DNA)模板擴(kuò)增到可以檢出的水平,從單個(gè)模板分子得到大約1012擴(kuò)增產(chǎn)物。而且RPA還用不著復(fù)雜的樣品處理,適用于無(wú)法提取核酸的實(shí)地檢測(cè)。RPA不僅可以對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行終點(diǎn)檢測(cè),還可以對(duì)擴(kuò)增過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控,甚至可以通過(guò)試紙條(側(cè)流層析試紙條LFD)讀取結(jié)果。
目前,TwistAmp? 試劑盒的擴(kuò)增子長(zhǎng)度在500bp以內(nèi)。不過(guò),經(jīng)過(guò)特別優(yōu)化的RPA擴(kuò)增,也可以生成更長(zhǎng)的擴(kuò)增產(chǎn)物,或者減慢擴(kuò)增速度(便于定量),甚至在更低的溫度下進(jìn)行反應(yīng)。
RPA的原理;
重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng)DNA合成,對(duì)模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合,防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中,由兩個(gè)相對(duì)的引物起始一個(gè)合成事件。整個(gè)過(guò)程進(jìn)行得非???,一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴(kuò)增產(chǎn)物。
檢測(cè)方法
1電泳檢測(cè)
2熒光檢測(cè)
3側(cè)向流試紙條檢測(cè)
DNA R&D KITTwistAmp Basic酶和必要試劑
客戶提供引物和模板Twirla
TwistAmp exo
適用于real-time熒光探針檢測(cè)Twista,T16
TwistAmp nfo(核酶)
適用于末端三明治法檢測(cè)DNA擴(kuò)增反應(yīng)側(cè)向流試紙方法
Twirla