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發(fā)布時間:2021-08-15 08:27  






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重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動 DNA合成,對模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的 DNA鏈與SSB結(jié)合,防止進(jìn)一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。


RPA能實(shí)現(xiàn)多重化嗎

可以。需要注意的是,RPA反應(yīng)的引物總量(nmol)不要超標(biāo)太多。如果在一個反應(yīng)中使用兩個以上的擴(kuò)增引物,就應(yīng)該控制不同引物的量。另外,我們應(yīng)當(dāng)事先考慮好檢測多個擴(kuò)增事件的探針、設(shè)備以及熒光團(tuán)的兼容性。


對于核酸提取技術(shù)的不同,樣本裂解及核酸純化環(huán)節(jié)不盡相同,操作繁瑣程度不同,提取效率、核酸的純度亦會不同。而復(fù)雜的操作更易導(dǎo)致氣溶膠污染,帶來風(fēng)險。因此,選擇合適的提取技術(shù),對當(dāng)前疫情防控至關(guān)重要。



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