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等溫核酸試劑盒
重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)技術(shù),是近幾年出現(xiàn)的有望替代PCR的新的核酸擴(kuò)增技術(shù)。RPA技術(shù)由Piepenburg等于2006年創(chuàng)立,該技術(shù)基于重組酶聚合酶介導(dǎo)的擴(kuò)增原理,體外模擬生物體內(nèi) DNA 復(fù)印,在恒溫條件下即可對目的片段進(jìn)行擴(kuò)增,特別適用于快速檢測,特別適用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物安全、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域,已被成功應(yīng)用到多種病原的快速檢測上。
核酸試劑盒
RPA的特性:快速檢測 15min進(jìn)行單分子檢測試驗(yàn), 簡易包裝 穩(wěn)定凍干形式試劑. 無需熱循環(huán)過程 擺脫任何儀器束縛. 便攜 設(shè)備要求低,貧瘠條件亦能 完成檢測
RPA能實(shí)現(xiàn)多重化嗎
可以。需要注意的是,RPA反應(yīng)的引物總量(nmol)不要超標(biāo)太多。如果在一個(gè)反應(yīng)中使用兩個(gè)以上的擴(kuò)增引物,就應(yīng)該控制不同引物的量。另外,我們應(yīng)當(dāng)事先考慮好檢測多個(gè)擴(kuò)增事件的探針、設(shè)備以及熒光團(tuán)的兼容性。
“一般來說,核酸檢測是目前準(zhǔn)確的診斷方法?!庇腥烁嬖V記者,核酸檢測試劑盒出現(xiàn)假陰性,即沒有發(fā)現(xiàn)隱藏的病毒,可能與兩個(gè)方面有關(guān)。一是樣品沒有采集到。這一點(diǎn)很容易理解。例如,咽拭子采樣時(shí)人比較難受,深度不夠可能會采集不到含有病毒的樣本。但這樣的情況應(yīng)該很少發(fā)生。
另一個(gè)假陰性的原因是核酸檢測試劑盒的探針和引物質(zhì)量有波動,特別是定量的不造成檢測的不準(zhǔn)確。換句話說,由于這一次各家核酸檢測試劑盒供應(yīng)商都是臨時(shí)啟動,有些準(zhǔn)備不足,或是執(zhí)行規(guī)定步驟不到位,導(dǎo)致在生產(chǎn)過程中不進(jìn)行定位,或是酶活性不足,或是酶中含有抑制酶鏈反應(yīng)的重金屬離子等,都可能造成檢測結(jié)果出現(xiàn)假陰性。