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等溫核酸試劑盒
RNA試劑盒使用方法
使用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要購買提取試劑盒, 如果不是試劑盒,或許能提出RNA,但不能確保其質(zhì)量以及完整性,會(huì)影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析等后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。
當(dāng)前提取效果好的是QIANGEN公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒,但其售價(jià)較高,單次實(shí)驗(yàn)費(fèi)用花費(fèi)太大,對(duì)精度要求不高的實(shí)驗(yàn)沒有必要購買,當(dāng)然還有其它的進(jìn)口試劑盒,但是均存在價(jià)格高、訂貨周期長(zhǎng)的問題(如果碰上國內(nèi)無貨的時(shí)候,要從國外發(fā)貨,會(huì)等很長(zhǎng)一段時(shí)間)。普通的提取實(shí)驗(yàn)用國產(chǎn)的試劑盒就足以,價(jià)格不高,基本上各地均有現(xiàn)貨,如天根(目前國內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種)等,其價(jià)格比進(jìn)口試劑盒要便宜許多,且效果還不錯(cuò),還可以。
當(dāng)然,就RNA的提取而言,不一定試劑盒的提取效果就非常好,其實(shí)采用一些經(jīng)典的RNA提取方法,效果也很不錯(cuò),如:TRIZOL、EDTA等,只是試劑盒使用方便,經(jīng)典的方法操作復(fù)雜一些。
數(shù)字PCR法和熒光PCR法的關(guān)鍵區(qū)別在于檢測(cè)結(jié)果的定量和相對(duì)定量差異。據(jù)了解,現(xiàn)階段數(shù)字PCR試劑和機(jī)器相價(jià)格加高(一臺(tái)儀器近百萬元),在SARS-CoV-2快速檢測(cè)中的優(yōu)勢(shì)并不大。
不過,由于具備自動(dòng)化程度更好、耗時(shí)更短等技術(shù)優(yōu)勢(shì),國內(nèi)多家掌握了數(shù)字PCR技術(shù)的核酸試劑研發(fā)企業(yè)正在嘗試開發(fā)適用于SARS-CoV-2檢測(cè)的相關(guān)試劑盒。
“強(qiáng)烈推薦CT影像作為目前新冠的診斷方法”,她表示,“病毒核酸檢測(cè)是確診新型冠狀病毒無創(chuàng)診斷的金標(biāo)準(zhǔn),然而檢測(cè)結(jié)果‘CT陽性、核酸陰性’的結(jié)果,可能影響臨床排查。目前新型冠狀病毒核酸檢測(cè)特異性高、敏感性偏低,不排除存在部分假陰性?!?
在現(xiàn)實(shí)中,也出現(xiàn)了核酸試劑盒檢測(cè)數(shù)次陰性,卻確診為新冠的案例。