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Tris常用作生物緩沖液,常配成pH值為6.8,7.4,8.0,8.8。其結(jié)構(gòu)式,pH值隨溫度變化很大。一般來說,溫度每升高一度,PH值下降0.03。Tris被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖液的制備。例如,在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的TAE和TBE緩沖液(用于核酸的溶解)都需要用到Tris。由于它含有氨基因此可以與醛發(fā)生縮合反應(yīng)。Tris為弱堿,在室溫(25℃下,它的pKa為8.1;根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。Tris堿的水溶液pH在10.Chemicalbook5左右,一般加入鹽酸以調(diào)節(jié)pH值至所需值,即可獲得該pH值的緩沖液。
氨基(Tris)正是因?yàn)閷?duì)環(huán)境沒什么危害,所以在一些化妝品、中間體、生物化學(xué)的研究中等使用的比較廣泛。而它本身有很高的緩沖能力,在水中溶解度高,對(duì)很多酶反應(yīng)是惰性的,使Tris成為用于許多生化目的非常滿意的緩沖液。一般用于穩(wěn)定反應(yīng)體系的pH,在pH7.5-9.0之間有較強(qiáng)的緩沖能力。Tris緩沖液應(yīng)用越來越廣泛,甚至有超過磷酸鹽緩沖液的趨勢,由于其不與鈣、鎂離子、重金屬離子反應(yīng),性能很多方面優(yōu)于磷酸鹽緩沖液。
三羥(Tris)作為一種常用的生物緩沖劑,因它的結(jié)構(gòu)簡單,反而有活性,易于參與反應(yīng),所以我們可以通過它的分子結(jié)構(gòu)制備出與它相關(guān)的產(chǎn)品。如Bis-Tris, Tricine,TES,TAPS等均為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常使用的緩沖劑,它們的分子結(jié)構(gòu)中都含有Tris的分子結(jié)構(gòu)。它也常被用作RNA雜交和DNA裂解的緩沖液。在Tris的使用中,需要注意:Tris緩沖液的pH值受溫度和濃度影響很大,因此在配制過程中要考慮使用環(huán)境。且來看看它在Bis-Tris, Tricine,TES,TAPS中如何發(fā)揮它的潛能的。
常用作緩沖溶液的酸類由弱酸及其共軛酸鹽組合成的溶液具有緩沖作用。常見的緩沖體系有:
1、弱酸和它的鹽(如HAc---NaAc)
2、弱堿和它的鹽(NH3·H2O---NH4Cl)
3、多元弱酸的酸式鹽及其對(duì)應(yīng)的次級(jí)鹽(如NaH2PO4---Na2HPO4)的水溶液組成。
而生化實(shí)驗(yàn)室常用的緩沖系主要有磷酸、檸檬酸、碳酸、醋酸、酸、Tris(三羥)等系統(tǒng),生化實(shí)驗(yàn)或研究工作中要慎重地選擇緩沖體系,因?yàn)橛袝r(shí)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素并不是緩沖液的pH值,而是緩沖液中的某種離子。如硼酸鹽、檸檬酸鹽、磷酸鹽和三羥等緩沖劑都可能產(chǎn)生不需要的化學(xué)反應(yīng)。