{食品微生物}檢測——{大腸gan菌}

——大腸gan菌簡介——

    大腸埃希氏菌(Escherichia coli)通常被稱為大腸gan菌，是Escherich在1885年發(fā)現(xiàn)的，在相當(dāng)長的一段時間內(nèi)，一直被當(dāng)作正常腸道菌群的組成部分，認(rèn)為是非致病菌。保藏方法：1、定期移植法亦稱傳代培養(yǎng)保藏法，指將junzhong接種于適宜的斜面培養(yǎng)基上，最適條件下培養(yǎng)，完成培養(yǎng)于4～6℃進(jìn)行保存并間隔一定時間(3-6個月)進(jìn)行移植培養(yǎng)的一種短期種保藏方法。直到20世紀(jì)中葉，才認(rèn)識到一些特殊血型的大腸gan菌對人和動物有病原性，尤其對嬰兒和幼畜(禽)，常引起嚴(yán)重腹瀉和壞血癥，它是一種普通的原核生物，根據(jù)不同的生物學(xué)特性將致病性大腸gan菌分為6類:腸致病性大腸gan菌(EPEC)、腸產(chǎn)毒性大腸gan菌(ETEC)、腸侵襲性大腸gan菌(EIEC)、腸血性大腸gan菌(EHEC)、腸黏附性大腸gan菌(EAEC)和彌散粘附性大腸gan菌(DAEC).。大腸gan菌屬于革蘭氏陰性細(xì)菌(G-)。

微生物限度檢查

微生物計數(shù)法系用于能在有氧條件下生長的嗜溫細(xì)菌和真菌的計數(shù)。

   當(dāng)本法用于檢查非無菌制劑及其原、輔料等是否符合相應(yīng)的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)時，應(yīng)按下述規(guī)定進(jìn)行檢驗，包括樣品的取樣量和結(jié)果的判斷等。除另有規(guī)定外，本法不適用于活菌制劑的檢查。

   微生物計數(shù)試驗環(huán)境應(yīng)符合微生物限度檢查的要求。檢驗全過程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影響供試品中微生物的檢出。單向流空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應(yīng)定期進(jìn)行監(jiān)測。

   如供試品有抗jun活性，應(yīng)盡可能去除或中和。供試品檢查時，若使用了中和劑或滅活劑，應(yīng)確認(rèn)其有效性及對微生物無毒性。

   供試液制備時如果使用了表面活性劑，應(yīng)確認(rèn)其對微生物無毒性以及與所使用中和劑或滅活劑的相容性。

1.平皿法

   平皿法包括傾注法和涂布法。除另有規(guī)定外，取規(guī)定量供試品，按方法適用性試驗確認(rèn)的方法進(jìn)行供試液制備和菌數(shù)測定，每稀釋級每種培養(yǎng)基至少制備2個平板。

   培養(yǎng)和計數(shù) 除另有規(guī)定外，胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板在30～35℃培養(yǎng)3～5天，沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板在20～25℃培養(yǎng)5～7天，觀察菌落生長情況，點計平板上生長的所有菌落數(shù)，計數(shù)并報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數(shù)。由于其種類繁多、來源廣泛、危害巨大，并具有群爆發(fā)、宿主范圍廣、傳播速度快和社會影響強烈、控制難度大等特點，是引發(fā)食品安全危害的重要因素，嚴(yán)重時會危及人類健康甚至社會安定，造成巨大經(jīng)濟損失。點計菌落數(shù)后，計算各稀釋級供試液的平均菌落數(shù)，按菌數(shù)報告規(guī)則報告菌數(shù)。若同稀釋級兩個平板的菌落數(shù)平均值不小于15，則兩個平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。

   菌數(shù)報告規(guī)則 需氧菌總數(shù)測定宜選取平均菌落數(shù)小于300cfu的稀釋級、霉菌和酵母菌總數(shù)測定宜選取平均菌落數(shù)小于100cfu的稀釋級，作為菌數(shù)報告的依據(jù)。41-2016食品安全標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗?zāi)cgan菌科檢驗《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》（2015版）《化妝品安全技術(shù)規(guī)范》（2015版）《中國藥典》（2015版）。取zui高的平均菌落數(shù)，計算1g、1ml或10c㎡供試品中所含的微生物數(shù)，取兩位有效數(shù)字報告。

   如各稀釋級的平板均無菌落生長，或僅zui低稀釋級的平板有菌落生長，但平均菌落數(shù)小于1 時，以<1 乘以zui低稀釋倍數(shù)的值報告菌數(shù)。