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羧基磁珠 這類磁珠除了能夠像硅羥基磁珠一樣在高濃度離液鹽環(huán)境中結合核酸分子之外,還能通過另一種特殊的機制與核酸分子結合。通過向溶液中加入一定濃度的PEG和NaCl,可以使得核酸分子從伸展的構象逐漸蜷縮成小球狀,其上的負電荷也大部分被屏蔽掉,促使核酸分子吸附到磁珠上。核酸分子的分子量越大,越傾向于發(fā)生這種從伸展線團向蜷縮小球的構象變化,因此,通過調節(jié)鹽溶液與核酸樣本的體積比,能夠實現較大分子量的核酸片段在羧基磁珠表面的優(yōu)先吸附,達到所謂的片段篩選效應。
以磁性微球為固相介質對蛋白質進行提純是一項新興的蛋白質分離技術。傳統的蛋白質分離方法如鹽析、、膜分離技術、離子交換技術和層析技術等,通過改變pH值、溫度、離子強度、介電常數等因素來達到分離的目的,分離過程繁雜,而且目標蛋白質的損失大。而蛋白質的磁分離是通過對磁性微球表面的改性,共價結合能被目標蛋白質識別和可逆結合的配基,然后進行目標蛋白質的分離。在磁分離過程中,將磁性微球直接放入含有目標蛋白質的混合溶液中,目標蛋白質與磁性微球緊密結合,然后利用外部磁場進行分離。整個分離過程不需對混合溶液的pH值、溫度、離子強度和介電常數進行調整,從而避免了傳統分離過程中蛋白質的損失。與傳統分離方法相比較,蛋白質的磁分離技術具有快速、高純、高收率等優(yōu)點。
固定化酶是通過物理的或化學的方法,將酶分子束縛在載體上,使其既保持酶的天然活性,又便于與反應液分離,可以重復使用,它是酶制劑中的一種新劑型。運用磁性高分子微球作為結合酶的載體,具有以下優(yōu)點:有利于固定化酶從反應體系中分離和回收,操作簡便。對于雙酶反應體系,當一種酶的失活較快時,就可以用磁性材料來固載另一種酶,回收后反復使用,降低成本;磁性載體固載酶放入磁場穩(wěn)定的流動床反應器中,可以減少持續(xù)反應體系中的操作,適合于大規(guī)模連續(xù)化操作;利用外部磁場可以控制磁性材料固定化酶的運動方式和方向,替代傳統的機械攪拌方式,提高固定化酶的催化效率。
磁性微球在細胞標記和細胞分離上的應用
細胞分離是生物細胞學研究中一種十分重要的技術,的細胞分離在細胞分離是生物細胞學研究中一種十分重要的技術,的細胞分離在臨床中是首要的、重要的步驟。這種細胞分離技術在臨床診斷上有廣范的應用,例如需在輻射前將抽出,且要將癌細胞從液中分離出來。
傳統的細胞分離技術主要采用離心法,利用密度梯度原理進行分離,時間長、效果差。隨著合成磁性微球的發(fā)展,磁性微球在分離細胞方面已經獲得了快速的發(fā)展,經動物臨床試驗已獲成功。其中重要的是選擇一種生物活性劑或者其他配體活性物質(如、熒光物質、外源凝結素等),根據細胞表面糖鏈的差異,使其僅對特定細胞有親和力,從而達到分離、分類以及對其種類、數量分布進行研究的目的。