為避免提取的核酸在柜內反復循環(huán)，造成標本之間的交叉污染，出現(xiàn)假陽性結果，該區(qū)域配備的生物安全柜必須是B2型的。生物安全柜工作區(qū)垂直氣流全部來自實驗室，排風經(jīng)過過濾器(www.rfilter.com)過濾后直接排至室外，不允許回到安全柜和實驗室中。

根據(jù)經(jīng)驗，如果實驗室內配備生物安全柜，每配備一臺，實驗室的面積增加10m2;標本制備區(qū)的面積宜在25m2~30m2之間。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為正壓，以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。

擴增室該區(qū)域主要進行的操作為DNA或cDNA擴增。此外，已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區(qū))的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應混合液等也可在本區(qū)內進行。

在巢式PCR測定中，通常在輪擴增后必須打開反應管，因此巢式擴增有較高的污染危險性，第二次加樣必須在本區(qū)內進行。

擴增室主要配備PCR實驗室的核心儀器PCR儀，本文實例中使用了ABI7500和ABI9700兩種PCR儀。

在實驗室建造過程中，需要給PCR儀配備專門的UPS電源，以保證其正常工作。該區(qū)面積控制在15m2~20m2。

本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應盡量減少在本區(qū)內的不必要的走動。個別操作如加樣等應在超凈臺內進行。建議采用5~10Pa壓差，在控制上比較容易實現(xiàn)。

集成式核酸檢測實驗室優(yōu)勢

無需改造現(xiàn)有實驗室，直接補充專用PCR實驗室，快速形成對冠狀病毒的檢測能力；更加安全，嚴格按照P2(BSL-2)實驗室要求進行設置，在工廠完成第三方驗收，保證實驗人員安全；防護，有效的廢棄物、廢氣、廢水的收集和處理措施，保證周邊環(huán)境和人員安全；實施簡單，現(xiàn)場只需要預留配電（約30KW）、給水接口（或水箱）、污水（或專用小型污水處理裝置）；實施時間短，現(xiàn)場僅需4小時即能安裝、調試完成；轉運快速，可進行機動式快速轉運，能對疫情嚴重地區(qū)進行快速的補充；升級簡單，可配套增加血常規(guī)、生化模塊實驗室，進行檢測能力的升級，具備完整發(fā)熱檢驗科能力；成本低廉，僅需54萬元就能實施完成，遠低于同類改造實驗室價格；配備基礎檢測設備每天可實現(xiàn)768人份樣品檢測，配置高通量自動化檢測設備可實現(xiàn)3072人份檢測能力。

注：檢測設備不包括在此次配置內

低配：每2小時檢測一批次，每批次可檢測96人/份，每天可檢測8批次，每天可檢測：8*96＝768人份；

高配：每2小時檢測一批次，每批次可檢測384人/份，每天可檢測8批次，每天可檢測：8*384＝3072人份。

集成式核酸檢測實驗室設計依據(jù)

集成式核酸檢測實驗室應主要根據(jù)以下規(guī)范及要求進行設計、建設：

?新型冠狀病毒的實驗室檢測技術指南(第三版)?機構臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法2010?GB 50346-2011 生物安全實驗室建筑技術規(guī)范?GB19489-2008 實驗室生物安全通用要求?GB50849-2014 ：建筑設計規(guī)范?GB50686-2011 ：建筑施工及驗收規(guī)范?GB/T35428-2017 ：醫(yī)院負壓隔離病房環(huán)境控制要求?WS 233-2002微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則

PCR實驗室建設PCR實驗室如何分區(qū)？應該分3區(qū)還是4區(qū)呢？

標準的PCR實驗室可分成4個區(qū)域，按操作流程包括：

1）

試劑準備區(qū)：擴增試劑的配制、分裝、保存。

2）

樣本制備區(qū)：樣本分裝，核酸提取、保存。

3）

核酸擴增區(qū)：提取純化的核酸上機擴增。

4）

產(chǎn)物分析區(qū)：擴增產(chǎn)物結果分析，生成報告。

隨著核酸檢測方法的優(yōu)化和實驗儀器的功能強化，PCR實驗走向了自動化和高通量，這大大降低了病毒檢測的時間、提高了檢測的效率，也改變了普通PCR實驗室建設的平面布局。如全自動定量PCR實驗室可設置為試劑制備區(qū)、樣本處理區(qū)、核酸擴增和產(chǎn)物分析區(qū)，后兩個區(qū)合并（用于新冠病毒檢測的PCR實驗室）。一體化自動化PCR實驗室設置試劑制備和自動檢測區(qū)，后三個區(qū)合并