間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二(抗)0.1ml;5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;6.’后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙夾心法”的4、5、6。

常用的是40孔聚凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。(2) 包被(或抗原)的選擇:將(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。

主要有:(1)自身檢測試劑盒,包括ELISA和IFA類;(2)ELISA試劑盒,包括人、大鼠、小鼠、兔、狗、羊、猴子、豬、豚鼠、馬類、尿、細胞培養(yǎng)上清液檢測試劑盒;(3)流式細胞儀用試劑類,包括CD系列、系列等;(4)乳膠手工及上機試劑,包括透光比濁檢測試劑;(5)檢測試劑盒,包括微色譜柱類檢測試劑;