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單目生物顯微鏡發(fā)展的初期階段
單目生物顯微鏡(光學(xué)顯微鏡發(fā)展的初期階段1.0) 顯微鏡發(fā)展初期,光學(xué)技術(shù)不發(fā)達(dá),當(dāng)時制成的顯微鏡為單光路直筒設(shè)計,只能使用一只目鏡進(jìn)行觀察,因此常被稱作單目顯微鏡。單目顯微鏡受當(dāng)時的電子、機(jī)械、信息等技術(shù)的局限,通常具有以下幾種特點:①采用反光鏡反射自然光提供照明;②粗、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋采用分離式手輪;③載物臺為單層結(jié)構(gòu),且不可移動。
用于顯微鏡觀察的標(biāo)本
用于顯微鏡觀察的標(biāo)本 用于顯微鏡觀察的標(biāo)本必須經(jīng)過一定的準(zhǔn)備過程才能在顯微鏡下形成清晰的像。在入射照明和投射照明中,對于標(biāo)本的光學(xué)要求有很大區(qū)別,在入射照明中像是由標(biāo)本的反射光所形成的;相反,在投射照明中像是由透射光所形成的,在這種情況下反射光對于像的形成不僅無益,而且會降低像的清晰度。 用入射光觀察的標(biāo)本,它的準(zhǔn)備工作十分簡單,只是清潔標(biāo)本的表面并切割為適當(dāng)大小的小塊。而用透射光觀察的標(biāo)本,必須具有由于光吸收的差異而產(chǎn)生的一定反差,才能在顯微鏡下被觀察到。為此,標(biāo)本必須經(jīng)過一系列復(fù)雜的處理和制備過程,這種制備技術(shù)就是我們一般所說的生物顯微技術(shù)。從光學(xué)觀點出發(fā),對于用透射光觀察的顯微鏡標(biāo)本有如下要求: 1、適當(dāng)?shù)暮穸? 這種厚度在較好的光學(xué)系統(tǒng)中能夠達(dá)到盡可能高的分辨力,并且與這個系統(tǒng)的場深相適應(yīng)。 2、足夠的透明度。 3、能夠形成建立在吸收差異上的足夠的反差。
熒光顯微鏡的調(diào)節(jié)采用透射激發(fā)時,可以使用蘭色光線
熒光顯微鏡的調(diào)節(jié) 采用透射激發(fā)時,可以使用蘭色光線根據(jù)普通明場照明法進(jìn)行照明系統(tǒng)的調(diào)節(jié),這包括光源調(diào)節(jié)及聚光鏡中心的調(diào)節(jié)。如果采用暗場聚光鏡,則還需要注意暗場聚光鏡的使用及調(diào)節(jié)方法,當(dāng)用蘭色光線調(diào)節(jié)好后,就可采用更換濾的方法,使標(biāo)本得到所需要的激發(fā)光線照射標(biāo)本,但要注意使遏止濾光片已在光路中,這樣可以保護(hù)觀察者眼睛免受紫外線損傷。 采用反射激發(fā)時,先在光路中加入綠色激發(fā)濾光片組,把照明可變孔徑光闌與視場光闌完全打開,調(diào)節(jié)光源位置,使照明光束通過物鏡轉(zhuǎn)換器的螺孔中央并使光源成象于物平面上,此時物鏡螺孔應(yīng)是通孔(不裝物鏡) 。檢查激發(fā)光束是否通過物鏡螺孔中央,可在螺孔端面上放置半透明紙觀察光源光斑是否居中,在某些顯微鏡中,光源是在垂直面內(nèi)調(diào)節(jié)其上下左右位置,而光源成象是通過集光鏡沿軸方向移動來達(dá)到的。 在安裝光源時要注意光源表面不能沾污手指印及其他斑痕, 以免點燃過后, 難以清潔,因此,新安裝光源時,使用前燈殼表面可用紗布蘸上酒精等揩檫干凈,此外,還需要注意電極方向,根據(jù)光源要求進(jìn)行安裝,以免發(fā)生意外或點燃不亮,燈管應(yīng)裝入燈箱內(nèi)方可點燃,以防萬一傷人。 激發(fā)濾光片及遏止濾光片如何組合使用應(yīng)根據(jù)不同熒光標(biāo)本的激發(fā)方法進(jìn)行選擇,一般也可根據(jù)使用說明書推薦的配套方法進(jìn)行選用。