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做親和柱時(shí),使用Sepharose 4B 和 Sepharose CL-4B有何不同?
Sepharose 4B指4%的瓊脂糖
Sepharose CL-4B指4%高度鉸鏈的瓊脂糖
他們的區(qū)別在于鉸鏈程度不一樣,在親和層析色譜中,介質(zhì)鉸鏈程度越高,化學(xué)穩(wěn)定性就應(yīng)該越高。這樣就可以耐受更加苛刻條件洗脫而偶聯(lián)的配基不會(huì)脫落。越是硬質(zhì)的介質(zhì),耐受的流速也會(huì)越高。這樣更節(jié)省平衡洗脫的時(shí)間。
親和柱產(chǎn)品列表2
真菌毒素親和柱
產(chǎn)品名稱(chēng):IAC109 產(chǎn)品名稱(chēng):桔青霉素親和柱 規(guī)格:3ml,25支/盒 檢測(cè)樣品:糧食、辣椒、紅曲制品等
產(chǎn)品名稱(chēng):IAC111 產(chǎn)品名稱(chēng):嘔吐毒素親和柱 規(guī)格:1ml/3ml,25支/盒 檢測(cè)樣品:糧食、面粉、飼料、酒等
產(chǎn)品名稱(chēng):IAC112 產(chǎn)品名稱(chēng):赭曲霉毒素A親和柱 規(guī)格:1ml/3ml,25支/盒 檢測(cè)樣品:谷物、花生、飼料、調(diào)味品、中藥等
親和柱介紹
生物分子之間的親和識(shí)別包括抗體和抗原、酶和底物和受體等之間的親合作用,這些親和作用屬于生物專(zhuān)一性識(shí)別;此外,某些物質(zhì)和生物大分子之間還有一些特異性作用,如染料和某些酶(特別是脫氫酶和激酶等),植物凝集素和糖蛋白,金屬離子和蛋白質(zhì)表面的組氨酸等之間的作用,都可以應(yīng)用于親和分離過(guò)程。
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親和柱的應(yīng)用
應(yīng)用:牛奶中黃曲霉毒素M1的測(cè)定
(參考方法GB 541337-2010 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 乳和乳制品中黃曲霉毒素M1 的測(cè)定)
樣品前處理
稱(chēng)取50g牛奶到具塞離心管中,在水浴中加熱到35-37℃,4000轉(zhuǎn)離心15min,除去上層乳脂,全部樣品待過(guò)柱凈化
樣品過(guò)柱凈化
1. 將親和柱(SBHL-20-0245)連接于10ml或50ml注射管下。
2. 將處理好的樣品全部通過(guò)親和柱,控制試樣以2mL/min-3mL/min穩(wěn)定的流速過(guò)柱。(注意:空氣不能通過(guò)柱體)
3. 以穩(wěn)定的流速淋洗柱子兩次,棄去全部流出液,并使2mL-3mL空氣通過(guò)柱體。
4. 洗脫,流速為1mL/min-2mL/min,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測(cè)用。