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發(fā)布時(shí)間：2021-10-07 04:23

ELISA試劑盒檢測(cè)過(guò)程中的注意事項(xiàng)

ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則

1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過(guò)2%?？捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但要有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。

2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。

3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。

4、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保存。

5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

6、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。

8、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用儀器的晃動(dòng)功能。

ELISA試劑盒——ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則

1、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。

2、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加徹底。倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。

3、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。

4、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。

5、檢測(cè)前，要打開酶標(biāo)，使之穩(wěn)定10分鐘以上。

6、底物有一定的毒性，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。

7、待檢樣品要澄清，否則會(huì)影響結(jié)果。

8、溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。

9、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

10、對(duì)結(jié)果有疑問(wèn)的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。

Elisa試劑盒的注意事項(xiàng)

Elisa試劑盒是否滅活：加熱可滅清中補(bǔ)體系統(tǒng)，在較少數(shù)情況下（培養(yǎng)ES細(xì)胞，平滑肌細(xì)胞時(shí)）建議滅活，在培養(yǎng)其余細(xì)胞時(shí)不建議滅清。滅活非常容易產(chǎn)生沉淀，如必須滅活請(qǐng)按56℃，30 min，輕微搖晃原則操作，滅活溫度高、時(shí)間長(zhǎng)、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。

Elisa試劑盒培養(yǎng)基：無(wú)培養(yǎng)基在結(jié)果重復(fù)性、細(xì)胞體外分化方面有優(yōu)勢(shì)，但是，仍然是培養(yǎng)液中基本的添加物，尤其是在原代培養(yǎng)或細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)不良時(shí)，常常會(huì)先使用有的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，待細(xì)胞生長(zhǎng)旺盛后再換成培養(yǎng)液。