等溫核酸試劑盒

RNA試劑盒使用方法

使用時一定要根據(jù)自己的實驗需要購買提取試劑盒， 如果不是試劑盒，或許能提出RNA，但不能確保其質(zhì)量以及完整性，會影響RT-PCR、Northern blot、Dot blot、Real time RT PCR、芯片分析、polyA 篩選、體外翻譯、RNase 保護分析等后續(xù)實驗的結(jié)果。

當前提取效果好的是QIANGEN公司生產(chǎn)的RNA提取試劑盒，但其售價較高，單次實驗費用花費太大，對精度要求不高的實驗沒有必要購買，當然還有其它的進口試劑盒，但是均存在價格高、訂貨周期長的問題（如果碰上國內(nèi)無貨的時候，要從國外發(fā)貨，會等很長一段時間）。普通的提取實驗用國產(chǎn)的試劑盒就足以，價格不高，基本上各地均有現(xiàn)貨，如天根（目前國內(nèi)生產(chǎn)的試劑盒中銷售面比較廣的一種）等，其價格比進口試劑盒要便宜許多，且效果還不錯，還可以。

當然，就RNA的提取而言，不一定試劑盒的提取效果就非常好，其實采用一些經(jīng)典的RNA提取方法，效果也很不錯，如：TRIZOL、EDTA等，只是試劑盒使用方便，經(jīng)典的方法操作復(fù)雜一些。

重組酶聚合酶擴增技術(shù)（RPA)是2006年由英國科學(xué)家研發(fā)的一種核酸恒溫擴增技術(shù)。它是利用多種酶參與，在體外模擬生物體內(nèi)DNA復(fù)印，恒溫條件下短時間內(nèi)實現(xiàn)靶基因大量擴增，既可以擴增DNA，也可以擴增RNA。RPA技術(shù)具有恒溫、快速、便攜、靈敏度高、特異性強和操作簡單等優(yōu)點，是目前很有望替代PCR技術(shù)的核酸等溫擴增方法，在基層現(xiàn)場診斷中，具有廣闊的應(yīng)用前景。

相對來說RPA是很好的恒溫擴增法，可在較低溫下恒溫擴增，不需要復(fù)雜儀器設(shè)備，操作簡單、反應(yīng)時間短，特異性好、靈敏度高，可采用電泳、熒光、側(cè)向流試紙等多種方式檢測擴增產(chǎn)物

目前市場上各家生物企業(yè)研發(fā)出的核酸檢測試劑盒已經(jīng)超過100種，但由于缺乏RNA標準物質(zhì)，無法對檢測方法進行量值傳遞和對試劑盒檢測結(jié)果的準確度進行評價，好的國產(chǎn)試劑盒競爭力也無法得到證明。為此，急需研制RNA標準物質(zhì)來評價這些病毒核酸檢測試劑盒的質(zhì)量和準確度，為試劑盒檢測結(jié)果的判定提供準繩。