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PCR實驗室條件:
1、必須擁有標(biāo)準(zhǔn)的的PCR熒光實驗室;實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出由于該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點(diǎn),目前已得到廣泛應(yīng)用。本文試就其定量原理、方法及參照問題作一介紹
2、檢測設(shè)備必須符合標(biāo)準(zhǔn)PCR熒光實驗室設(shè)置要求;熒光定量PCR儀 實時熒光定量試劑 通用電腦 自動分析軟件,構(gòu)成PCR-DNA/RNA實時熒光定量檢測系統(tǒng)。
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PCR實驗室平面布局(一級屏障)
設(shè)計根據(jù)實驗場所提供的場地空間,設(shè)計微生物實驗區(qū),以建筑面積為23m2為例。應(yīng)設(shè)有一個P2主實驗室,一個一更緩沖間,一個二更緩沖間,一個洗刷消毒間。
設(shè)計充分利用現(xiàn)有的空間,根據(jù)國家相關(guān)規(guī)范和實驗場所的特殊要求進(jìn)行平面布置??紤]生物安全實驗室應(yīng)同時實施一級屏障和二級屏障的要求,其中一級屏障主要體現(xiàn)在微生物實驗區(qū)的平面布置和維護(hù)結(jié)構(gòu)方面,二級屏障主要體現(xiàn)在空調(diào)凈化系統(tǒng)方面。在平面布置方面把人和物流分隔開,防止人和物的gan染:實驗操作人員通過一更緩沖間和二更緩沖間進(jìn)入P2主實驗室;實驗物體通過兩個互鎖式傳遞窗進(jìn)出P2主實驗室,其中一個互鎖式傳遞窗設(shè)在主實驗室和準(zhǔn)備間之間,另外一個設(shè)在主實驗室和洗刷消毒室之間,保證了潔凈物不受gan染,同時保證了污染物盡快傳進(jìn)洗刷消毒室進(jìn)行消毒滅菌。
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PCR實驗室工作區(qū)域的嚴(yán)格劃分
(1)各個實驗區(qū)域設(shè)置合理;
(2)各個實驗區(qū)域要有明顯的標(biāo)記(如醒目的門牌或不同的地面顏色等),以避免各個不同實驗區(qū)域設(shè)備物品、試劑等發(fā)生混淆。
PCR實驗室合理的系統(tǒng)設(shè)置
(1)合理的空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置,盡量采用全送全排的空調(diào)系統(tǒng);
(2)嚴(yán)格的氣流壓力控制,保證不同的實驗區(qū)內(nèi)不同的壓力要求。