武漢默沙克生物????科技有限公司是一家專門從事生物制劑研發(fā)與生產(chǎn)的企業(yè)。目前可提供各種抗1體、免疫學(xué)試劑盒、生化試劑、ELISA試劑盒、分子生物學(xué)試劑等多用途多屬種的高品質(zhì)產(chǎn)品，服務(wù)涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。

【預(yù)期用途】

 適用于酶聯(lián)免疫反應(yīng)中的顯色階段。

【檢驗(yàn)原理】

原理是應(yīng)用酶聯(lián)免疫學(xué)基本原理——當(dāng)標(biāo)記在抗1體或抗原上的酶與顯色液中的TMB、H2O2等反應(yīng)，加入終止液后溶液由無色變成黃色，黃色深淺反應(yīng)ELISA體系中抗原抗1體結(jié)合的多少，從而判斷某種抗原或抗1體的多少。3、細(xì)胞培養(yǎng)上清取細(xì)胞培養(yǎng)上清到離心管，1000×g離心20min，除去細(xì)胞碎片及雜質(zhì)，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。在通過酶1標(biāo)儀測(cè)讀吸光值，判斷免疫反應(yīng)的程度。

【主要組成成份】

底物顯色液A液：檸檬酸，30%H2O2

底物顯色液B液（避光保存）：EDTA-Na，檸檬酸，甘油 ，TMB。

4）  吸取勻漿液到離心管，4℃ 5000×g 離心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。

6、  尿液、唾液等其他液體生物樣本

1000×g離心20min，取上清即可檢測(cè)。

總的來說，因?yàn)镋LISA只能檢測(cè)可溶性蛋白的含量，所以應(yīng)保證所有樣本均為澄清的液體，沉淀或懸浮物都應(yīng)離心去除。

為了保證檢測(cè)的準(zhǔn)確性，保存于-20℃或-80℃的樣本1好在1~6個(gè)月內(nèi)檢測(cè)；4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

另外，還應(yīng)保證樣本不含NaN3，因?yàn)镹aN3會(huì)抑制HRP的活性，從而導(dǎo)致假陰性的結(jié)果。

1.　ELISA的原理

　　ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗1體的固相化及抗原或抗1體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗1體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗1體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。全血標(biāo)本于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘。在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗1體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗1體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗1體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗1體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。