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如何對微生物菌種進行活化
1 定期移植法的菌種復蘇較簡單,直接轉(zhuǎn)接即可;
2 液體石蠟法保存的菌種在復蘇時,挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,生長繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次;
3 沙土管法保存菌種在復蘇時,在無菌條件下打開沙土管,取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上,長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次?;蛉∩惩亮S谶m宜的液體培養(yǎng)基中,增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面;
4 真空冷凍干燥法保存菌種在復蘇時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,將安瓿管頂部燒熱, 用無菌棉簽沾冷水,在頂部擦一圈,頂部出現(xiàn)裂紋,用挫刀或鑷子頸部輕叩一下,敲下已開裂的安瓿管的頂端,用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌塊,使用無菌吸管移入新鮮培養(yǎng)基上,進行適溫培養(yǎng);
5 -80℃ 冰箱凍結(jié)法保存菌種復蘇時,從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)
6 液氮超低溫凍結(jié)法保存菌種復蘇與-80℃ 冰箱凍結(jié)法保存菌種復蘇相似,從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當搖動。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。
什么是低溫生物菌種的保藏?
將需要保藏的菌種,接種在適宜的斜面培養(yǎng)基上,菌絲長滿斜面時,用硫酸紙包扎棉塞或者硅膠塞,放置在4℃的冰箱中保藏,叫做斜面(菌種)低溫保藏法。由于微生物的新陳代謝活動未停止,試管內(nèi)培養(yǎng)基易失水變干。因此,保藏時間較短,不適于長期保藏。每隔3~6個月應轉(zhuǎn)管一次。草菇菌種不耐低溫,需保藏在10~12℃之間。或在草菇菌落上灌注3~4毫升的防凍劑(10%的甘油)。當菌絲長滿斜面后,在無菌條件下,用無菌橡皮塞代替棉塞,并用石蠟密封,即可在室溫或冰箱中保藏。這種方法可防止雜菌污染,隔絕氧氣,避免培養(yǎng)基干燥,使用方便。據(jù)測定,保藏3年的菌種生活力仍很旺盛。