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HPLC定性分析的主要方法與技術(shù)。

使用保留值定性方法

在所有定性分析方法中， HPLC使用保留值定性分析的方法是基本的方法，他就是合理地運用色譜的一些基本知識對有機化合物所作的反應(yīng)，從而得出有機化合物應(yīng)具有的性質(zhì)。HPLC中，兩種相同的物質(zhì)在同一色譜中應(yīng)具有相同的保留值，因此， HPLC中的定性分析就能充分地應(yīng)用到這一原理，用相同的色譜對未知物質(zhì)進行簡單的成分和性質(zhì)判斷，同時在同一物質(zhì)組分下色譜上形成的未知峰保留值也是一樣的，這樣就可以初步判定未知有機化合物。HPLC的流動相在此基礎(chǔ)上，適當改變流動相來判斷未知有機化合物的基本性質(zhì)，而在連續(xù)變化的過程中，當發(fā)現(xiàn)兩個保留值峰值相同時，我們可以簡單地判斷為未知有機化合物的性質(zhì)相同。盡管 HPLC的保留值定性分析方法可以區(qū)分同樣的物理性質(zhì)，但不能保證具有相同保留值的兩個有機化合物是同一種物質(zhì)，因此在實際應(yīng)用中， HPLC利用保留值定性分析的方法雖然簡單，而且很具操作性，但適用范圍較窄，不能適應(yīng)更多未知有機化合物的性質(zhì)判定。

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一九四一年，瑪?shù)俣鞯葘柡凸枘z作為固定相，用含乙醇的作為流動相，分離乙?；被崾莻€應(yīng)用分配色譜。在總結(jié)已有成果的基礎(chǔ)上，提出了的色譜塔板理論。

液固色譜是先創(chuàng)立的色譜方法，初大多采用碳酸鈣、硅膠、氧化鋁填充的玻璃柱管，其流動相加于柱管±端，靠重力作用下移；組分檢測依賴肉眼觀察或?qū)⑽絼闹苤腥〕?，再進行進一步分析。液-固色色譜問世50多年來，在液-固色色譜設(shè)備上還沒有實質(zhì)性的進步。20世紀60年代以前，隨著 GC知識的積累， GC的系統(tǒng)理論和實踐經(jīng)驗被應(yīng)用到液相色譜研究中，開發(fā)出細粒度填充色譜柱，大大提高了液相色譜的分離能力。用高壓泵輸送流動相代替重力作用，提高了柱的效率，加快了液相色譜分析的速度。LC和光學(xué)檢測器的結(jié)合，使它從初的以分離為主要目的，發(fā)展成為同時完成分離分析任務(wù)的重要分析手段。

伴隨著固定相的發(fā)展和裝柱技術(shù)的發(fā)展，液相色譜柱效不斷提高。此外，還提出了以精細粒徑固定相為基礎(chǔ)的 HPLC的應(yīng)用。

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色譜法是一種色譜法。層析法有兩種相，一相為流動相，另一相為固定相。如液體為流動相，則稱為液相色譜，而流動相為氣體，稱為氣相色譜。

氣體色譜法的優(yōu)點：

①分選效i率高，分析速度快，如能在2小時內(nèi)將汽i油樣品分離出200多個色譜峰，一般分析樣品20分種即可完成。

②氣樣用量少，檢測靈敏度高，如氣樣用量1毫升，液體樣品用量0.1微升固體樣品的用量為幾微克。使用合適的檢測儀可以檢測到百萬分之十到十億分之一的雜質(zhì)。

③選擇性好，可分離、分析恒沸混合物，具有相似沸點的物質(zhì)、某些同位素、順式異構(gòu)體鄰、間、對位異構(gòu)體、旋光異構(gòu)體等。

④適用范圍廣，雖然主要用于各種氣體及易揮發(fā)有機物的分析，但在一定條件下，還可對高沸物和固體樣品進行分析。主要應(yīng)用領(lǐng)域為石油工業(yè)、環(huán)境保護、臨床化學(xué)、制藥和食品工業(yè)。

氣體色譜法缺陷

當對成分進行直接定性分析時，必須以已知或已知數(shù)據(jù)與相應(yīng)色譜峰相比較，或與其它方法(如質(zhì)譜、光譜)結(jié)合使用，才能得到直接確定的結(jié)果。定量時，常常需要用已知物純樣品對被測信號進行校正。

原則：

GC分析是一種多組份混合物的分離、分析技術(shù)。用氣體作為流動相(載氣)，當樣晶被送入進樣器并氣化后，由載氣攜帶到填充柱或毛細柱，由于樣晶中各組份的沸點、極性和吸附系數(shù)的差異，使各組份在柱中被分離，然后被撞擊到柱后的檢測器根據(jù)各組份的物理化學(xué)特性，將轉(zhuǎn)換后的電信號 I固序檢測出來，將轉(zhuǎn)換后的電信號送到色譜工作站，由色譜工作站對各組份進行分析，得到各組份的分析結(jié)果。

特征：

1.全自動在結(jié)式非甲皖總怪分析系統(tǒng)，具有控制、數(shù)據(jù)采集、積分計算、數(shù)據(jù)上傳等功能

2.可實現(xiàn)意外斷電、回電后，微電腦、儀器控溫、儀器分析、數(shù)據(jù)上傳等功能將自啟動

3.能在 FID意外滅火后自動切斷氫氣并報警

4.能同時分析全怪、甲皖、苯系物等多種氣體

5.色譜組分的標定、分析、實時顯示、維護等功能，通過簡潔的界面操作完成

6.軟件界面簡潔易用