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等溫核酸試劑盒
TwisAmp Liquid Exo說明
以靈活的液體形態(tài)進(jìn)行實時熒光 RNA 擴增。若想要將 RPA 與 TwistDx 熒光 TwistAmp? exo 探針結(jié)合使用,則推薦使用本產(chǎn)品。除了基本的組分,還包含強大的核酸酶(核酸外切酶 III),該酶將在擴增反應(yīng)期間處理 TwistAmp? exo 探針并產(chǎn)生實時讀出。用戶只需提供引物、探針、dNTP 和模板。
非常適用于:實時熒光 DNA 檢測,便于使用不同的 RPA 反應(yīng)體積或改變組分比例
Product code: TALQEXO01
RPA的原理;
重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動DNA合成,對模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合,防止進(jìn)一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進(jìn)行得非???,一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴增產(chǎn)物。
核酸試劑盒
TwistAmp? Liquid 是為了提供散裝液體形態(tài)的核心 RPA 組分,*終用戶能夠以不同的比例混合這些組分,以便用戶為各自的應(yīng)用配制預(yù)混液。
即用型RPA檢測試劑盒
非常適合用于開發(fā)或測試RPA技術(shù),無需再開發(fā)您自己的檢測方法。在不同開發(fā)階段所提供的這些即用型試劑盒內(nèi)含有一整套用于檢測主要食物病原體靶標(biāo)的通用RPA試劑組分,靈活易用*。
如何提高擴增曲線的可重復(fù)性?
優(yōu)化擴增曲線考慮以下因素: 對于低拷貝數(shù)模板,不穩(wěn)定擴增可能是因為達(dá)到檢測限或者是反應(yīng)混勻程度不同(未混勻的反應(yīng)擴增效率不佳)。另外,在低溫情況下存貯,重組酶和輔助蛋白在50%甘油情況下形成沉淀,也是可能導(dǎo)致不穩(wěn)定擴增的原因。所以,20x核心反應(yīng)mix在室溫下解凍并震蕩渦旋將使其成為液體,不影響其功能,并且有效提高擴增效率。不穩(wěn)定擴增也可能是因為master mix量不足,在加入體系前,用戶必須保證震蕩后20x核心反應(yīng)組分均一。