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電泳儀儀器原理
區(qū)帶電泳則需用各種類型的物質(zhì)作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠-G薄層等,分子生物學(xué)領(lǐng)域中常用的是瓊脂糖凝膠電泳。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運(yùn)動,不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運(yùn)動速度不同,根據(jù)這一特征,應(yīng)用電泳法便可以對不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組份分析或單個組份提取制備,這在臨床檢驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)研究中具有極其重要的意義。差別只在于制膠和電泳不在電泳管中,而是在兩塊垂直放置的平行玻璃板中間。電泳儀正是基于上述原理設(shè)計(jì)制造的。
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電泳儀
凝膠電泳被廣泛用于分子生物學(xué)、遺傳學(xué)和生物化學(xué):1.大的DNA或者RNA分子通常利用瓊脂糖凝膠電泳(agarose gel electrophoresis)分離,也可以使用聚酰胺凝膠電泳(PAGE)。2.蛋白質(zhì)的凝膠電泳通常在加入聚酰胺凝膠中進(jìn)行(SDS-PAGE),或者非變性凝膠電泳,或二維電泳。 SDS-PAGE 蛋白質(zhì)凝膠電泳圖。 3.毛細(xì)管電泳 4.酶譜法(zymography) 5.變性梯度膠凝電泳(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis,DGGE) 瓊脂糖和聚酰胺可以制成各種形狀、大小和孔隙度。瓊脂糖凝膠分離DNA片度大小范圍較廣,不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長度從200bp至近50kb的DNA片段。影響電泳結(jié)果(泳動度)的原因溶液的pH值溶液的pH值決定了帶電顆粒解離的程度,也決定了物質(zhì)所帶凈電荷的多少,對于蛋白質(zhì),氨基酸等電解質(zhì)而言,溶液pH值離電點(diǎn)越遠(yuǎn),顆粒所帶凈電荷越多。瓊脂糖通常用水平裝置在強(qiáng)度和方向恒定的電場下電泳。聚酰胺分離小片段DNA(5-500bp)效果較好,其分辯力極高,甚至相差1bp的DNA片段就能分開。聚酰胺凝膠電泳很快,可容納相對大量的DNA,但制備和操作比瓊脂糖凝膠困難。聚酰胺凝膠采用垂直裝置進(jìn)行電泳。目前,一般實(shí)驗(yàn)室多用瓊脂糖水平平板凝膠電泳裝置進(jìn)行DNA電泳。
電泳儀代碼故障處理方法
Er1:輸出電壓超過大值。
Er2:輸出電流超過大值。
檢查電泳緩沖液濃度是否過高。電泳儀運(yùn)行時是否插拔電泳槽。
Er3:短路。
切斷電源后拔掉電泳槽連接線,重新開機(jī)看是否不再報(bào)警,則正常。
仍舊報(bào)警則可能芯片損壞,需返修。
Er4:未接負(fù)載。
檢查電泳緩沖液濃度是否過低。
電泳槽連接線未插好,或接觸不良。怎么弄連接線都弄不好的話返修。
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電泳儀注意事項(xiàng)
1.電泳儀/電泳槽通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應(yīng)先斷電,以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2.儀器通電后,不要臨時增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。
3、電泳儀/電泳槽使用過程中發(fā)現(xiàn)異?,F(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,以免發(fā)生意外事故。
以上就是為大家介紹的全部內(nèi)容,希望對大家有所幫助。如果您想要了解更多的電泳儀的知識,歡迎撥打圖片上的熱線聯(lián)系我們。