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發(fā)布時(shí)間:2021-10-14 07:28  






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反相萃取分離主要是利用固相萃取材料官能團(tuán)與目標(biāo)化合物碳?xì)滏I之間的非極性作用力。反相非極性的 SPE柱通常更適合從極性基質(zhì)中提取分離出非極性和中等極性的目標(biāo)化合物。對(duì)利用非極性作用力吸附于非極性 SPE柱的目標(biāo)化合物,可用氯i仿、環(huán)i己烷、乙i酸乙i酯等具有非極性的溶劑洗脫。當(dāng)溶劑的洗脫強(qiáng)度足夠大,可以使目標(biāo)化合物與吸附劑非極性基團(tuán)間的范德華力不受影響時(shí),使其在 SPE柱中順利洗脫。即使是極性更強(qiáng)的甲i醇,對(duì)許多化合物而言,也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時(shí)候,單種溶劑無法完全洗脫疏水性的目標(biāo)化合物,可以考慮使用二氯甲i烷:乙i酸乙i酯(1:1,體積比)。

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對(duì)典型的硅膠基質(zhì)鍵合反相柱體,在不使用緩沖液的情況下,建議采用下列清洗溶劑系列:甲i醇---乙晴---75%乙晴/25%異丙i醇---異丙i醇---二氯甲i烷---己烷;每種溶劑至少?zèng)_洗10個(gè)柱體,分析柱的洗滌流速為250 mm×4.6 mm。zui終以10柱體積異丙i醇過渡,然后返回到原始流動(dòng)相(不含緩沖鹽),zui后返回到初始流動(dòng)相配置。如使用紫外檢測(cè)器,則應(yīng)避免選擇在紫外區(qū)域有吸收作用的溶劑,否則需要使用大量的溶劑沖洗基線,以使基線穩(wěn)定。四氫呋i喃也是常用的清潔溶劑。如懷疑柱子受到嚴(yán)重污染,也可用二甲亞砜(DMSO)或二甲i基胺與水按50:50的比例混合,用流速低于0.5 ml/min的水沖洗色譜柱。



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在填充壓實(shí)后, SPE小柱的填料形成柱床,當(dāng)溶劑流過小柱時(shí),速度過快會(huì)產(chǎn)生兩個(gè)問題:一是對(duì)粘結(jié)相填料而言,由于流速過快,使其不能充分浸潤(rùn)舒展,從而導(dǎo)致其保留活性降低;二是過快的流速會(huì)使小柱形成溝槽,使小柱沒有充分浸潤(rùn),從而減少吸附填料與樣品的接觸面積,影響目標(biāo)物質(zhì)的傳質(zhì)過程,從而降低回收率。

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當(dāng)柱流速度為0-3.0 mL/min時(shí),由于橫截面積較大,柱床較低,溝槽效應(yīng)較小,因而適用于高流速條件下的大體積水樣的富集;當(dāng)離子交換和特定吸附作用時(shí),填料和分析靶物的作用時(shí)間較長(zhǎng)。

在離子交換小柱中,保持目標(biāo)物質(zhì)的離子化而不是分子態(tài)是關(guān)鍵,而在離子交換小柱的交換機(jī)理中,則與其實(shí)驗(yàn)結(jié)果直接相關(guān)。對(duì)硅膠鍵合C18小柱的萃取,由于硅膠(SiOH)不能完全“封口”,當(dāng) pH大于4.0時(shí),硅膠都會(huì)帶負(fù)電,從而使能電離的化合物與硅膠發(fā)生作用,加強(qiáng)了這一次個(gè)作用理(主要作用力是非極性相互作用力),使這類物質(zhì)對(duì)硅膠-C18的保持力增強(qiáng)。





防爆柱結(jié)構(gòu):

管柱:一種吸附劑載體,由級(jí)聚制成,一般呈形狀。有些制造商還提供玻璃柱用于特殊分析(例如 PAEs分析)。圓柱管端部出口尺寸已標(biāo)準(zhǔn)化,可用于不同廠家固相萃取多管真空裝置。

篩選板:對(duì)吸附液和過濾液進(jìn)行固定。聚乙烯是一種常用的篩板材料,對(duì)其進(jìn)行特殊分析還可以采用特氟隆,不銹鋼片或玻璃等材料。

吸附劑:固體萃取柱中起分離作用的物質(zhì)。早些時(shí)候還廣泛用于柱色譜的Al2O3、 florisil、石墨化炭黑等吸附劑,現(xiàn)在仍然在固相萃取過程中使用;現(xiàn)在常見的吸附劑是由各種球形硅膠顆粒鍵合官能團(tuán)制得的硅膠吸附劑;上世紀(jì)后期發(fā)明的有機(jī)聚合物吸附劑,如聚二乙烯基苯-N-乙烯吡咯烷酮,已在許多應(yīng)用中取代了硅膠鍵合吸附劑。

輔助設(shè)備:儲(chǔ)樣器,增加柱管上的容器體積,提高單次上樣量;適配器,將柱管和柱管、柱管和儲(chǔ)樣器連接起來。






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